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產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試劑(jì)盒
商(shāng)品屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱 | 規格 | 貨號 |
|
魚(yú)特定(dìng)基(jī)因(yīn)序(xù)列PCR檢測(cè)試劑盒 |
50T |
YS-P015307 |
儲存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避免反(fǎn)復(fù)凍融。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光。
有效期：一年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試劑(jì)盒(hé)的有效(xiào)期一(yī)般(bān)為1年，這(zhè)是指(zhǐ)在適當的儲(chǔ)存溫(wēn)度下(xià)。核酸擴增部分的(dí)試劑一般要(yào)貯存於-20℃下，產(chǎn)物檢測(cè)部分(fēn)試劑則貯存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分(fēn)析(xī)條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛好超過正常陰(yīn)性質(zhì)控品擴增曲(qū)綫(xiàn)的最(zuì)高點。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的檢測結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽性(xìng)，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期，Ct值應小於(yú)等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要求需在一(yī)次(cì)實(shí)驗中(zhōng)同時滿足(zú)，否則該次實(shí)驗視為無效(xiào)。
【結果判斷】
2.可(kě)疑：有明顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本建(jiàn)議復(fù)核一次，若復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增期，則判(pàn)定(dìng)為陽(yáng)性，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定為陰(yīn)性；
3. 陰性：無指數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值均判定為陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙染，試劑(jì)汙染，樣品交叉汙染會出(chū)現(xiàn)假陽性(xìng)結果；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存不當或試(shì)劑(jì)配製不(bù)準(zhǔn)確引起(qǐ)的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下降，可能會導致(zhì)出現假陰性結果。
PCR反應的特(tè)異(yì)性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成(chéng)反應的(dí)忠實(shí)性(xìng)；
④靶基因的特異性與保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
魚特定基因(yīn)序列PCR檢測試(shì)劑盒其(qí)中引物與模板(bǎn)的正確(què)結合(hé)是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)結(jié)合及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶合(hé)成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高(gāo)溫性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中模(mó)板與引(yǐn)物的(dí)結(jié)合(復(fù)性)可以在(zài)較高(gāo)的溫度(dù)下(xià)進行，結合(hé)的特異(yì)性大大(dà)增加，被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段(duàn)也就(jiù)能(néng)保持很(hěn)高(gāo)的(dí)正確度。再通(tōng)過(guò)選擇特(tè)異性和保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因區，其(qí)特異性程度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生(shēng)成(chéng)量是以指數(shù)方式增(zēng)加的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始待測模板擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出(chū)一個靶細胞；在(zài)病毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應用耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一次性地將反(fǎn)應液加(jiā)好後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴增(zēng)液和水浴鍋上(shàng)進(jìn)行變(biàn)性(xìng)-退火(huǒ)-延伸(shēn)反(fǎn)應，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴(kuò)增反應。擴增(zēng)產物(wù)一(yī)般用電泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不一(yī)定要(yào)用同(tóng)位素(sù)，無放(fàng)射(shè)性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求(qiú)低
不需要分(fēn)離病毒(dú)或(huò)細(xì)菌(jūn)及培養細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總RNA均可作(zuò)為擴增(zēng)模板。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨床標本如(rú)血液(yè)，體腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發，細胞，活PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
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