產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測試(shì)劑盒
豬高(gāo)致(zhì)病性藍耳病(bìng)毒(dú)RT-PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
商品屬性
| 產品(pǐn)名稱 | 規格(gé) | 貨號(hào) |
|
豬(zhū)高致病性藍耳病毒RT-PCR檢測試(shì)劑盒(hé) |
50T |
YS-P015336 |
儲存條件：-20℃避(bì)光保存，避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避光。
有(yǒu)效期(qī)：一年(nián)
貨期：現貨PCR試(shì)劑盒(hé)的有效(xiào)期一般為1年，這是指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的試(shì)劑一(yī)般要(yào)貯存(cún)於-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑(jì)則貯存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融。
【結(jié)果(guǒ)分析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性質控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應為陽(yáng)性，有明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於等於35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需在一(yī)次(cì)實驗中(zhōng)同時(shí)滿足(zú)，否(fǒu)則該次(cì)實驗視(shì)為(wéi)無效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑：有明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本(běn)為可疑樣(yàng)本；對於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建議(yì)復(fù)核一次，若(ruò)復核結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指數擴增期，則判定為陽性(xìng)，否(fǒu)則判定為(wéi)陰性；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定為陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗室環境汙染(rǎn)，試劑(jì)汙染，樣(yàng)品交(jiāo)叉(chā)汙染會出(chū)現假陽性結(jié)果；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保(bǎo)存不當或(huò)試(shì)劑(jì)配製不準確引(yǐn)起的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測效能(néng)下降，可能會(huì)導致出現假陰(yīn)性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的(dí)特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成反應的忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基因的特異性(xìng)與(yǔ)保守(shǒu)性(xìng)。
豬高致(zhì)病(bìng)性藍耳病毒RT-PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒其(qí)中引物(wù)與模板(bǎn)的(dí)正確結合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引物與模板的結(jié)合(hé)及(jí)引物鏈(liàn)的延(yán)伸(shēn)是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配對原則的(dí)。聚合酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫性(xìng)，使反(fǎn)應中(zhōng)模板與(yǔ)引物的(dí)結(jié)合(復性)可以(yǐ)在較高(gāo)的溫度下進(jìn)行，結合的(dí)特異性大(dà)大增加，被(bèi)擴(kuò)增的靶基(jī)因(yīn)片段也就(jiù)能保持很高(gāo)的正(zhèng)確(què)度。再通過(guò)選擇特異性和(hé)保守性高的(dí)靶(bǎ)基因區，其(qí)特(tè)異性程度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量是以指數(shù)方式(shì)增加的，能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的起始待(dài)測模(mó)板擴(kuò)增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細胞(bāo)中檢出一(yī)個靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病毒(dú)的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成單(dān)位)；在(zài)細菌(jūn)學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應用耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一次性地將反應液(yè)加好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液和水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸(shēn)反應(yīng)，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴增產(chǎn)物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不一定(dìng)要用同位素(sù)，無放(fàng)射性汙染(rǎn)，易推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的純度(dù)要求(qiú)低
不(bù)需要分(fēn)離(lí)病(bìng)毒(dú)或細菌及培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴增(zēng)模板(bǎn)。可直接(jiē)用臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如(rú)血液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛發，細胞，活PCR技術概(gài)論(lùn)。
