產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬性
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號 |
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豬痢(lì)疾(jí)密螺(luó)旋體PCR檢測試(shì)劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015340 |
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避免反復凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避光。
有(yǒu)效期：一年
貨期(qī)：現貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般為1年，這是(shì)指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存溫(wēn)度(dù)下。核酸擴增部分(fēn)的試(shì)劑一(yī)般(bān)要(yào)貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下，產物(wù)檢測部分(fēn)試(shì)劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結果分析(xī)條件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定(dìng)在剛好(hǎo)超過正常(cháng)陰性(xìng)質控品擴(kuò)增(zēng)曲綫的(dí)最(zuì)高(gāo)點。
【質(zhì)控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品的檢測結果應為陽性，有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需在(zài)一(yī)次(cì)實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時滿足(zú)，否(fǒu)則該次實(shí)驗視為(wéi)無(wú)效。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可疑：有明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可疑樣(yàng)本；對於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復(fù)核(hé)一(yī)次，若(ruò)復核結果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴增期，則(zé)判定為(wéi)陽性，否則(zé)判定為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗室(shì)環境汙染，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣品交叉汙染(rǎn)會(huì)出現假陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸，保存(cún)不當或試劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢測效能下(xià)降(jiàng)，可能會(huì)導(dǎo)致出現假(jiǎ)陰性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特異(yì)性：
②鹼基配對原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特異性與保(bǎo)守性(xìng)。
豬(zhū)痢(lì)疾密螺旋(xuán)體PCR檢測試劑盒(hé)其中(zhōng)引物與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確(què)結(jié)合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引物(wù)與模板的結(jié)合(hé)及(jí)引物鏈的延伸是遵循(xún)鹼基配對(duì)原則(zé)的。聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反應(yīng)的忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫性，使反(fǎn)應中模板與(yǔ)引物的(dí)結合(復性)可以在較高的(dí)溫度(dù)下進(jìn)行，結(jié)合(hé)的特(tè)異(yì)性大(dà)大增(zēng)加，被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基因片段也(yě)就(jiù)能(néng)保持很(hěn)高的(dí)正確度。再通(tōng)過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性(xìng)和(hé)保守性高(gāo)的(dí)靶基因區，其(qí)特異性程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生成(chéng)量(liáng)是以指數方式(shì)增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始(shǐ)待測(cè)模板擴(kuò)增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢出(chū)一個靶細(xì)胞；在(zài)病(bìng)毒的(dí)檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏度(dù)可達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成單(dān)位(wèi))；在細(xì)菌學(xué)中(zhōng)zui小檢出率(shuài)為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應用耐高溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一次(cì)性地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液(yè)加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴增液(yè)和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延伸(shēn)反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一(yī)般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析(xī)，不(bù)一定(dìng)要用(yòng)同位素(sù)，無(wú)放(fàng)射性汙染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本的純度要(yào)求低(dī)
不(bù)需(xū)要(yào)分離病毒或(huò)細菌及(jí)培(péi)養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為擴增模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接用臨床(chuáng)標本如血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽液(yè)，毛(máo)發，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術(shù)概論。
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