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產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測試劑盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱 | 規格 | 貨號 |
|
豬(zhū)流(liú)感病毒(dú)PCR檢測(cè)試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015344 |
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存，避免反復凍融。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避光(guāng)。
有效期：一年
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒的有效期一般為1年(nián)，這是(shì)指在適當的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度(dù)下。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部分的試(shì)劑一般要貯(zhù)存於-20℃下，產物檢測(cè)部(bù)分試劑則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反復(fù)凍融。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定在剛好超過正(zhèng)常陰(yīn)性質控品(pǐn)擴增曲(qū)綫(xiàn)的最高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控品的檢測結(jié)果應(yīng)為陽性(xìng)，有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需在一次實驗中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足，否則(zé)該次實驗視為無(wú)效。
【結果判斷】
2.可疑：有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本(běn)為可疑樣本(běn)；對於可(kě)疑樣本(běn)建議復核(hé)一(yī)次，若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴增期，則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽性，否(fǒu)則(zé)判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判(pàn)定為陰(yīn)性樣本(běn)。
【對檢驗結果的解釋(shì)】
1. 實驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉(chā)汙染會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽性結(jié)果；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸，保存(cún)不(bù)當或(huò)試劑配(pèi)製不準確(què)引起的(dí)試劑檢測(cè)效能下降(jiàng)，可能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異(yì)性：
②鹼基配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠實性；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異性與保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
豬(zhū)流(liú)感(gǎn)病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒其中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模板的正確結合(hé)是(shì)關(guān)鍵。引物與模板(bǎn)的(dí)結合(hé)及(jí)引物鏈(liàn)的延伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則的。聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠實性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模板與引物的結合(hé)(復性(xìng))可(kě)以在較高的(dí)溫度(dù)下進行，結(jié)合(hé)的特異性(xìng)大(dà)大(dà)增加，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基因片(piàn)段(duàn)也就(jiù)能保持很(hěn)高(gāo)的正確度(dù)。再(zài)通過選擇特(tè)異性和保(bǎo)守性(xìng)高的靶(bǎ)基因(yīn)區，其(qí)特異(yì)性程度就更高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成量是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增加的，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始(shǐ)待(dài)測(cè)模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶(bǎ)細(xì)胞；在病(bìng)毒的(dí)檢測(cè)中，PCR的(dí)靈敏度可達3個RFU(空斑形成(chéng)單位(wèi))；在細菌學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為3個(gè)細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次性地將反(fǎn)應(yīng)液加好後，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液和水浴鍋上進行變(biàn)性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸反應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小時完(wán)成擴增反應。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一般用(yòng)電(diàn)泳分析，不(bù)一(yī)定(dìng)要(yào)用(yòng)同位(wèi)素，無(wú)放(fàng)射性汙(wū)染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的(dí)純(chún)度要(yào)求(qiú)低
不需要(yào)分離病毒或細菌(jūn)及培養細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作(zuò)為(wéi)擴增(zēng)模板。可直接用臨床(chuáng)標本如血液，體腔液，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細(xì)胞，活PCR技(jì)術概(gài)論。
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