產品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測試劑盒
商品屬性
| 產品(pǐn)名稱 | 規(guī)格(gé) | 貨號 |
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轉(zhuǎn)基(jī)因(yīn)植物Bt基因PCR檢測(cè)試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015362 |
儲存條(tiáo)件：-20℃避光保存，避免反(fǎn)復凍融。
運輸：低溫，避光(guāng)。
有效期：一年(nián)
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試劑盒的有(yǒu)效期一般為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指在適當的(dí)儲存(cún)溫度(dù)下(xià)。核酸擴增(zēng)部分的(dí)試劑一般(bān)要(yào)貯存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分(fēn)試劑(jì)則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結果分(fēn)析條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在(zài)剛(gāng)好超過(guò)正(zhèng)常陰性質(zhì)控品擴增曲(qū)綫的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果應為陽性(xìng)，有明顯的指數擴增期，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於35；
3. 以上要求(qiú)需(xū)在(zài)一次實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足，否則(zé)該(gāi)次實驗視為無(wú)效(xiào)。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有明顯的指數擴增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可疑樣本；對於(yú)可(kě)疑(yí)樣本(běn)建議復(fù)核(hé)一次(cì)，若(ruò)復(fù)核(hé)結果Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則判定為陽(yáng)性，否(fǒu)則判定(dìng)為陰性；
3. 陰(yīn)性：無指數擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判定(dìng)為陰性樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境(jìng)汙(wū)染，試(shì)劑汙(wū)染，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染會(huì)出(chū)現假陽性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保(bǎo)存不當或試(shì)劑配製(zhì)不(bù)準確引起(qǐ)的(dí)試(shì)劑(jì)檢測效能下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會導致(zhì)出現假(jiǎ)陰性結(jié)果。
PCR反應(yīng)的特異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶基因的特異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
轉基因植(zhí)物(wù)Bt基(jī)因PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒其中引物與(yǔ)模板(bǎn)的正(zhèng)確(què)結合(hé)是關鍵(jiàn)。引物與模板的(dí)結合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈的延伸(shēn)是(shì)遵循鹼基配對(duì)原則(zé)的。聚合酶(méi)合成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性，使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模板與(yǔ)引物的(dí)結合(復性(xìng))可以在(zài)較高的溫度下進行，結合的特異(yì)性(xìng)大大增加(jiā)，被擴增的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)片段也(yě)就(jiù)能保持很高的正(zhèng)確度。再通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性和保守(shǒu)性高(gāo)的靶基因區，其(qí)特(tè)異(yì)性程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的生成量是以(yǐ)指數(shù)方(fāng)式增加(jiā)的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始(shǐ)待(dài)測模板擴(kuò)增到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬個細(xì)胞中(zhōng)檢出一(yī)個靶(bǎ)細胞；在(zài)病毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的(dí)靈敏度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單位)；在細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一次性地將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好後，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水浴鍋(guō)上(shàng)進行變(biàn)性(xìng)-退火-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應，一般(bān)在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反(fǎn)應。擴(kuò)增產(chǎn)物一(yī)般用電泳(yǒng)分(fēn)析，不一定要(yào)用(yòng)同位(wèi)素，無放(fàng)射性汙染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的純(chún)度(dù)要求(qiú)低
不(bù)需要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可作為擴增(zēng)模板。可(kě)直接用(yòng)臨床標(biāo)本如血液，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發(fā)，細胞，活PCR技術概(gài)論。
