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PCR檢測試劑盒
商品屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規格(gé) | 貨號 |
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轉(zhuǎn)基因植物(wù)S基(jī)因PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015361 |
儲存條(tiáo)件：-20℃避光(guāng)保存，避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一(yī)年(nián)
貨期：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有效期(qī)一般為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是(shì)指在適(shì)當的儲存溫度下(xià)。核(hé)酸擴增部分(fēn)的(dí)試(shì)劑一(yī)般(bān)要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產(chǎn)物檢(jiǎn)測部(bù)分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融。
【結果(guǒ)分(fēn)析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值綫(xiàn)設定(dìng)在剛好超過正常陰性質(zhì)控品擴增曲綫的最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控品的(dí)檢測結(jié)果(guǒ)應為陽(yáng)性(xìng)，有明(míng)顯的指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以上要(yào)求需(xū)在一次實驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足，否(fǒu)則該次實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑(yí)：有明顯的指數(shù)擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對於可(kě)疑(yí)樣本建議復核(hé)一次(cì)，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，則判定(dìng)為陽性(xìng)，否則判定為(wéi)陰性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰性樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的解釋】
1. 實驗室環境汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染會(huì)出(chū)現假(jiǎ)陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保存(cún)不當(dāng)或試劑配製不準(zhǔn)確(què)引起的(dí)試(shì)劑檢測效(xiào)能(néng)下(xià)降，可(kě)能會導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結果。
PCR反應的特(tè)異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反(fǎn)應的忠實性；
④靶基因(yīn)的特異性與(yǔ)保守性。
轉基(jī)因植物(wù)S基因(yīn)PCR檢測試劑盒(hé)其中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)正確結(jié)合是關鍵(jiàn)。引物(wù)與模板的結合(hé)及引物鏈的延(yán)伸是遵(zūn)循(xún)鹼基配對原則(zé)的。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反應的(dí)忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐(nài)高溫(wēn)性，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板與引物的(dí)結合(hé)(復(fù)性)可(kě)以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行(háng)，結(jié)合(hé)的特異(yì)性大(dà)大增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增的靶基因片段也(yě)就能保(bǎo)持(chí)很高的正(zhèng)確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過選擇特異性(xìng)和保(bǎo)守性(xìng)高的靶基因區，其特異性程度(dù)就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的(dí)生成量(liáng)是以(yǐ)指(zhǐ)數方式(shì)增加的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始待測模板(bǎn)擴增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個靶(bǎ)細胞(bāo)；在病毒(dú)的(dí)檢測(cè)中，PCR的靈敏度(dù)可達3個RFU(空斑形成單位)；在(zài)細(xì)菌學中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶，一(yī)次(cì)性地將(jiāng)反應液(yè)加好後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行變(biàn)性-退火(huǒ)-延伸(shēn)反應(yīng)，一(yī)般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成擴增反應。擴增產物一般(bān)用(yòng)電泳(yǒng)分析，不一定要用同位(wèi)素，無放射(shè)性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純(chún)度要求低(dī)
不(bù)需要(yào)分離病(bìng)毒或(huò)細(xì)菌及培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品及(jí)總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模板。可(kě)直接用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如血液(yè)，體腔(qiāng)液，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術概(gài)論(lùn)。
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