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核(hé)酸檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
日本乙型腦炎病(bìng)毒(JEV)核酸(suān)檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
| 產品名稱 | 規格 | 貨號(hào) |
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日(rì)本乙(yǐ)型腦炎病(bìng)毒(dú)(JEV)核(hé)酸檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P015420 |
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件(jiàn):-20℃避光(guāng)保存(cún),避(bì)免反復凍融(róng)。
運輸:低(dī)溫(wēn),避光(guāng)。
有效期:一年
貨(huò)期(qī):現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒(hé)的有效期一般為1年,這(zhè)是指在(zài)適當的儲存(cún)溫度(dù)下。核酸擴增(zēng)部分的試(shì)劑一般(bān)要貯(zhù)存於-20℃下(xià),產物(wù)檢測部分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免反復(fù)凍融。

u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定:將閾(yù)值綫設(shè)定在剛(gāng)好(hǎo)超過正常陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品擴增曲(qū)綫(xiàn)的最高(gāo)點。
2. 陽性質控(kòng)品的檢(jiǎn)測結果應為陽性(xìng),有明顯的(dí)指數擴(kuò)增期,Ct值應(yīng)小於等(děng)於35;
3. 以(yǐ)上要(yào)求需在一次(cì)實驗(yàn)中(zhōng)同時滿足,否則該(gāi)次(cì)實(shí)驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效。
2.可(kě)疑:有明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期(qī),且38≤Ct<40,此時(shí)樣本(běn)為可疑樣本;對於(yú)可疑樣本建(jiàn)議復核一(yī)次(cì),若復(fù)核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增(zēng)期,則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽性(xìng),否(fǒu)則(zé)判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng);
3. 陰(yīn)性:無指數擴增期(qī),Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解釋】
1. 實驗(yàn)室環境(jìng)汙染(rǎn),試劑汙(wū)染,樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會出現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果;
2. 試劑(jì)運輸,保存(cún)不當或試劑配製(zhì)不準確(què)引起的試劑(jì)檢測效(xiào)能下降,可能(néng)會(huì)導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結果。

②鹼基配(pèi)對原則(zé);
③Taq DNA聚合(hé)酶合成(chéng)反應的忠實性;
④靶基(jī)因的特異性(xìng)與保(bǎo)守性(xìng)。
日(rì)本乙型腦炎(yán)病毒(JEV)核酸(suān)檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)其中引(yǐn)物與(yǔ)模板的(dí)正確結合(hé)是關鍵。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)結(jié)合(hé)及引物鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是遵(zūn)循鹼基(jī)配對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合酶合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合酶耐高溫(wēn)性,使反(fǎn)應中模板與(yǔ)引(yǐn)物的結合(復性(xìng))可以在(zài)較高的溫度下進行,結合(hé)的特異(yì)性大(dà)大增(zēng)加,被(bèi)擴增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片段也(yě)就能(néng)保持很(hěn)高(gāo)的(dí)正(zhèng)確度。再通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異性和保守性(xìng)高的(dí)靶(bǎ)基因區,其特異性(xìng)程度(dù)就更高。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量是以(yǐ)指數(shù)方式(shì)增加(jiā)的,能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待測模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一個靶細胞(bāo);在病(bìng)毒的(dí)檢測(cè)中(zhōng),PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可達(dá)3個RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單位);在(zài)細(xì)菌(jūn)學中zui小檢出(chū)率為3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快(kuài)速
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐高溫的(dí)Taq DNA聚合酶,一(yī)次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液(yè)加好(hǎo)後(hòu),即在(zài)DNA擴增液和(hé)水浴(yù)鍋上進行變(biàn)性(xìng)-退火-延(yán)伸反應(yīng),一般(bān)在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增(zēng)反應。擴增(zēng)產物一(yī)般用電(diàn)泳分析(xī),不(bù)一定(dìng)要(yào)用(yòng)同位素(sù),無(wú)放射(shè)性(xìng)汙(wū)染,易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的純度要求(qiú)低
不需(xū)要(yào)分離病(bìng)毒或(huò)細菌(jūn)及(jí)培養細胞,DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可作為(wéi)擴增(zēng)模板。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血液,體腔液,洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè),毛(máo)發,細胞,活(huó)PCR技術概論。
