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核(hé)酸檢測試(shì)劑盒
小反芻(chú)獸疫(yì)通用型/疫苗株(PPR-U/ PPR-V)雙重(zhòng)核酸檢(jiǎn)測試劑盒
| 產品(pǐn)名稱 | 規格(gé) | 貨號(hào) |
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小反(fǎn)芻獸疫通(tōng)用型(xíng)/疫(yì)苗株(PPR-U/ PPR-V)雙重核(hé)酸檢測試(shì)劑盒(hé) |
50T |
YS-P015641 |
儲(chǔ)存條件:-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún),避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運輸:低(dī)溫,避(bì)光(guāng)。
有效期(qī):一年
貨(huò)期(qī):現(xiàn)貨PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期一般為1年,這是指在適當的儲存溫度下。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增部分的試(shì)劑(jì)一般要貯存於-20℃下,產物(wù)檢測部(bù)分試劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。

u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng):將閾值綫設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲綫的(dí)最高點。
2. 陽性質控品的(dí)檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽性(xìng),有(yǒu)明顯的指數擴增期,Ct值應(yīng)小於等於35;
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需在(zài)一(yī)次實(shí)驗中(zhōng)同時滿(mǎn)足,否則該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。
2.可(kě)疑:有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期,且38≤Ct<40,此時樣(yàng)本為可疑樣(yàng)本;對(duì)於(yú)可疑樣本建議復核(hé)一次,若(ruò)復(fù)核結(jié)果Ct<40且有指(zhǐ)數擴增(zēng)期,則判(pàn)定為陽(yáng)性(xìng),否則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性;
3. 陰(yīn)性:無指數擴增期(qī),Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判定為陰(yīn)性樣本。
【對檢驗結果的解(jiě)釋】
1. 實驗室(shì)環境汙(wū)染,試(shì)劑(jì)汙(wū)染,樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽性結(jié)果;
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸,保存不(bù)當或試劑配製不(bù)準確引起(qǐ)的試劑檢(jiǎn)測(cè)效能下降(jiàng),可能(néng)會導致出(chū)現假陰性(xìng)結(jié)果(guǒ)。

②鹼基(jī)配對原(yuán)則;
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性(xìng);
④靶基(jī)因的(dí)特異性(xìng)與保守性。
小(xiǎo)反(fǎn)芻獸疫(yì)通(tōng)用(yòng)型/疫(yì)苗(miáo)株(PPR-U/ PPR-V)雙(shuāng)重(zhòng)核酸(suān)檢測試劑盒其(qí)中(zhōng)引物與模(mó)板(bǎn)的(dí)正確結合(hé)是(shì)關鍵。引物與(yǔ)模板的結合及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸是(shì)遵循鹼基配(pèi)對(duì)原則的。聚合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高(gāo)溫(wēn)性,使(shǐ)反應中模板與(yǔ)引物(wù)的結(jié)合(復性)可以在較高的(dí)溫度下進行(háng),結(jié)合(hé)的特異(yì)性大大(dà)增(zēng)加(jiā),被擴(kuò)增的靶(bǎ)基因片段也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高(gāo)的(dí)正確度。再(zài)通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性和保(bǎo)守性高的靶基因區(qū),其(qí)特異性(xìng)程度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量是以指(zhǐ)數方式增(zēng)加的(dí),能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始待測模板(bǎn)擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬(wàn)個細(xì)胞中(zhōng)檢出一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞;在(zài)病毒的(dí)檢測(cè)中(zhōng),PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單位);在(zài)細菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便(biàn),快(kuài)速
PCR反應用耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi),一次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後(hòu),即(jí)在DNA擴增液和水浴(yù)鍋上(shàng)進行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng),一(yī)般(bān)在2~4 小時完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增產物(wù)一般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析(xī),不一(yī)定(dìng)要(yào)用同(tóng)位素,無(wú)放射性(xìng)汙染,易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標本(běn)的純度要(yào)求(qiú)低
不(bù)需要(yào)分離病毒或細菌及培(péi)養(yǎng)細胞(bāo),DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均可(kě)作(zuò)為擴增模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如(rú)血液,體腔(qiāng)液,洗(xǐ)嗽液(yè),毛(máo)發(fā),細(xì)胞(bāo),活PCR技術概論(lùn)。
