產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
商品屬性
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 規格(gé) | 貨號 |
|
羊衣原體 |
50T |
YS-P015451 |
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保存(cún)，避免反(fǎn)復(fù)凍融。
運輸(shū)：低溫，避光。
有(yǒu)效期(qī)：一(yī)年(nián)
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的(dí)有效(xiào)期一般為1年(nián)，這是指在適當的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度(dù)下。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的試(shì)劑(jì)一般(bān)要(yào)貯存於(yú)-20℃下，產物檢測部(bù)分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免反復凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值綫(xiàn)設定(dìng)在剛(gāng)好(hǎo)超過(guò)正(zhèng)常陰(yīn)性(xìng)質控品擴增曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng)，有明顯的指數擴增期，Ct值應小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求需(xū)在(zài)一次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足，否則(zé)該次實(shí)驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明顯的指數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本(běn)為可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對(duì)於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建議復核(hé)一次(cì)，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且有指數擴增(zēng)期，則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽性，否(fǒu)則判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無指數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判定為陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對檢驗(yàn)結果的解釋】
1. 實驗室環境(jìng)汙(wū)染，試劑(jì)汙染，樣品交叉(chā)汙染(rǎn)會出(chū)現假(jiǎ)陽性結(jié)果；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存不(bù)當或(huò)試(shì)劑配製不(bù)準確引起(qǐ)的試劑檢測效(xiào)能(néng)下(xià)降，可(kě)能會(huì)導(dǎo)致出現假陰(yīn)性結果。
PCR反應(yīng)的特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反應的忠實(shí)性；
④靶基因的(dí)特(tè)異性與保守性。
羊(yáng)衣原(yuán)體(tǐ)其(qí)中引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結合是關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板(bǎn)的結合(hé)及引物鏈的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循鹼基配對原則(zé)的。聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使反應中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結合(復性)可(kě)以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的溫度(dù)下(xià)進(jìn)行，結(jié)合的特異(yì)性大(dà)大增加，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的靶基因片段也就能保持很高的正確(què)度。再通(tōng)過(guò)選擇特(tè)異(yì)性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高的(dí)靶基(jī)因區(qū)，其(qí)特(tè)異性(xìng)程度(dù)就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成量是(shì)以指(zhǐ)數方式增(zēng)加的(dí)，能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待(dài)測(cè)模板擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢出(chū)一(yī)個靶(bǎ)細胞(bāo)；在病毒的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的靈敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形(xíng)成單(dān)位)；在(zài)細菌學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一次性地將(jiāng)反應(yīng)液加(jiā)好後(hòu)，即在(zài)DNA擴增(zēng)液和水浴鍋上進(jìn)行變性(xìng)-退(tuì)火-延(yán)伸反應，一般在(zài)2～4 小時(shí)完(wán)成擴(kuò)增反(fǎn)應。擴增產物(wù)一般用電泳分析，不(bù)一定要用(yòng)同位(wèi)素，無放(fàng)射(shè)性汙(wū)染，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度(dù)要求低
不需(xū)要分(fēn)離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製品及(jí)總RNA均可作為擴增模(mó)板。可直接(jiē)用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本(běn)如(rú)血(xiě)液，體(tǐ)腔液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發，細(xì)胞，活(huó)PCR技術概論(lùn)。
