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產品中心
PCR檢測試劑盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品名稱 | 規(guī)格(gé) | 貨號 |
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異嗜(shì)性小鼠白(bái)血病病(bìng)毒(dú)（X-MuLV）核酸檢測 |
50T |
YS-P015464 |
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún)，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避光(guāng)。
有(yǒu)效期：一年
貨期：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的有效期(qī)一般為1年，這是(shì)指在(zài)適(shì)當的儲(chǔ)存溫度下。核酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的(dí)試劑(jì)一(yī)般要(yào)貯存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢測部(bù)分試(shì)劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反(fǎn)復凍融。
【結果分(fēn)析條件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛好超過正常陰(yīn)性(xìng)質控品擴增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品的檢測結果應為(wéi)陽(yáng)性，有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應小於等於35；
3. 以上(shàng)要求需在(zài)一次(cì)實驗(yàn)中同時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否則該次(cì)實驗(yàn)視(shì)為無效。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為可疑(yí)樣本；對於可疑樣(yàng)本(běn)建議復核一次，若(ruò)復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增期，則判定(dìng)為(wéi)陽性，否(fǒu)則判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指數擴增期，Ct=40或無(wú)Ct值均判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗室環(huán)境汙染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉汙染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保(bǎo)存不當(dāng)或試劑(jì)配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確引起(qǐ)的試劑(jì)檢測(cè)效能下降(jiàng)，可(kě)能會導致出現假陰性(xìng)結果。
PCR反應的(dí)特異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基因的(dí)特異性與保(bǎo)守(shǒu)性。
異嗜(shì)性小(xiǎo)鼠白(bái)血病病(bìng)毒（X-MuLV）核酸檢(jiǎn)測其(qí)中引物(wù)與模(mó)板的(dí)正(zhèng)確結(jié)合是關鍵(jiàn)。引物與模(mó)板(bǎn)的結合及(jí)引物(wù)鏈的延伸是遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則(zé)的。聚合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模板與引(yǐn)物(wù)的結合(復性(xìng))可(kě)以在(zài)較高的(dí)溫度下進(jìn)行(háng)，結合的特異性(xìng)大大(dà)增加，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基(jī)因(yīn)片段(duàn)也(yě)就能保持(chí)很高(gāo)的(dí)正(zhèng)確(què)度(dù)。再通(tōng)過選擇特(tè)異性(xìng)和保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶基(jī)因區，其特(tè)異性(xìng)程度就更高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成量(liáng)是以指數方(fāng)式(shì)增加的，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模板擴增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞(bāo)；在病毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單(dān)位)；在(zài)細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一次性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液加好(hǎo)後，即在(zài)DNA擴增(zēng)液和水(shuǐ)浴鍋(guō)上進(jìn)行變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延伸反應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小時完(wán)成擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物(wù)一(yī)般(bān)用電泳分析(xī)，不(bù)一定(dìng)要用同位素(sù)，無放射性汙染(rǎn)，易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純度要求(qiú)低
不(bù)需要分(fēn)離(lí)病(bìng)毒或細菌及培(péi)養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均可(kě)作(zuò)為擴增(zēng)模板。可(kě)直接用(yòng)臨(lín)床標本(běn)如血(xiě)液，體腔液，洗嗽液，毛發，細胞，活(huó)PCR技(jì)術概論(lùn)。
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