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核(hé)酸檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
豬(zhū)瘟(wēn)病毒(dú)/豬藍耳(ěr)病病(bìng)毒通用型/高致病(bìng)性豬(zhū)藍耳病病(bìng)毒(CSFV/PRRSV-U/PRRSV-M)核酸(suān)檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨(huò)號 |
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豬瘟(wēn)病毒(dú)/豬藍耳(ěr)病病(bìng)毒通用(yòng)型/高致(zhì)病(bìng)性豬藍(lán)耳病病(bìng)毒(CSFV/PRRSV-U/PRRSV-M)核酸(suān)檢測(cè)試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015625 |
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光。
有效期：一年
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有效(xiào)期一般為1年(nián)，這是(shì)指在適(shì)當的儲存溫度下。核酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分的試劑一(yī)般(bān)要貯(zhù)存(cún)於-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測(cè)部分試(shì)劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免(miǎn)反復凍融。
【結果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值綫設(shè)定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超過正常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的最高點。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品(pǐn)的檢測(cè)結果(guǒ)應為陽性，有明顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小於等(děng)於(yú)35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在(zài)一(yī)次(cì)實驗中同(tóng)時滿足(zú)，否則(zé)該次實(shí)驗視為(wéi)無效(xiào)。
【結(jié)果判斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為可疑樣(yàng)本；對於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本建議(yì)復(fù)核(hé)一(yī)次，若(ruò)復核結果Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增期(qī)，則判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判定為(wéi)陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗結果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境汙染，試劑汙染，樣品(pǐn)交叉(chā)汙染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽性結果；
2. 試劑(jì)運輸，保(bǎo)存不(bù)當或試(shì)劑配(pèi)製不準確(què)引起的試劑檢(jiǎn)測(cè)效能下降(jiàng)，可能(néng)會導致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果。
PCR反(fǎn)應的特異性：
②鹼基配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶基因(yīn)的特(tè)異(yì)性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
豬(zhū)瘟(wēn)病(bìng)毒/豬(zhū)藍耳(ěr)病病毒(dú)通用(yòng)型/高致病(bìng)性豬(zhū)藍耳病(bìng)病(bìng)毒(CSFV/PRRSV-U/PRRSV-M)核(hé)酸檢測試劑盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與模板的正(zhèng)確(què)結合(hé)是關鍵。引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的(dí)結(jié)合及(jí)引(yǐn)物鏈的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵(zūn)循(xún)鹼基配(pèi)對(duì)原則的(dí)。聚合(hé)酶合成反應的忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高(gāo)溫性(xìng)，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板與(yǔ)引(yǐn)物的結(jié)合(hé)(復性)可以(yǐ)在較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度(dù)下(xià)進行，結(jié)合(hé)的特異(yì)性(xìng)大(dà)大(dà)增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增(zēng)的靶基(jī)因片段也就能保持很(hěn)高(gāo)的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再通過選擇特(tè)異(yì)性(xìng)和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高的(dí)靶基(jī)因區，其特異(yì)性程度就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產物(wù)的生(shēng)成量是以(yǐ)指數方(fāng)式增(zēng)加的，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢出一(yī)個靶細胞(bāo)；在病毒(dú)的檢測(cè)中，PCR的靈敏(mǐn)度可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單位)；在細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將(jiāng)反(fǎn)應液加好後(hòu)，即在DNA擴增液和水浴(yù)鍋上(shàng)進行變(biàn)性-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應。擴(kuò)增(zēng)產物一般(bān)用電泳分析，不一(yī)定要用同位素(sù)，無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙染，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純度要(yào)求低
不(bù)需要分(fēn)離(lí)病(bìng)毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及(jí)培(péi)養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為擴增模板。可(kě)直(zhí)接用臨(lín)床標本(běn)如血(xiě)液(yè)，體腔液，洗(xǐ)嗽液，毛發(fā)，細胞，活PCR技(jì)術概(gài)論。
