產品中(zhōng)心(xīn)
核(hé)酸(suān)檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產品名稱 | 規格 | 貨號 |
|
水(shuǐ)稻(dào)內源基(jī)因(yīn)SPS 核(hé)酸檢測試劑盒 |
50T |
YS-P015606 |
儲存條件：-20℃避光保存，避免反(fǎn)復凍融(róng)。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑盒的有(yǒu)效期一(yī)般為(wéi)1年，這是(shì)指在適當的儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下(xià)。核酸擴增(zēng)部分(fēn)的試劑一(yī)般要(yào)貯存於-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免反(fǎn)復凍融(róng)。
【結(jié)果分(fēn)析條(tiáo)件設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將閾(yù)值綫設定(dìng)在剛好超過(guò)正(zhèng)常陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高(gāo)點。
【質控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質控品的檢測(cè)結果應為(wéi)陽(yáng)性，有明(míng)顯的指數擴增(zēng)期(qī)，Ct值應(yīng)小於等於35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需(xū)在一次(cì)實驗中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足，否則(zé)該(gāi)次(cì)實驗視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果判斷】
2.可疑：有明顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為(wéi)可疑樣本；對於(yú)可(kě)疑樣本(běn)建(jiàn)議(yì)復(fù)核一次(cì)，若復核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增期，則判定(dìng)為陽(yáng)性(xìng)，否則判定為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無指數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定為陰性樣(yàng)本。
【對檢驗結果的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環(huán)境(jìng)汙染，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保存不當(dāng)或試(shì)劑配製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引起的試劑(jì)檢測效能下降(jiàng)，可能會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成反應的忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因的(dí)特(tè)異(yì)性與(yǔ)保守性。
水稻內源(yuán)基因SPS 核酸檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其中引物與(yǔ)模(mó)板的(dí)正確結合(hé)是關(guān)鍵。引(yǐn)物(wù)與模板(bǎn)的結合及引(yǐn)物鏈的(dí)延伸是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原則(zé)的(dí)。聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中模板與引物的(dí)結合(hé)(復(fù)性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度下進行(háng)，結(jié)合(hé)的特(tè)異性大大增加，被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基(jī)因片段也就(jiù)能保持很高的(dí)正(zhèng)確(què)度。再通過(guò)選(xuǎn)擇特異性和保(bǎo)守性(xìng)高的靶基因區(qū)，其特異(yì)性程度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生成量(liáng)是以(yǐ)指數方式(shì)增(zēng)加的，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測模板(bǎn)擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個細(xì)胞中檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶細(xì)胞；在病(bìng)毒的檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度可達3個RFU(空斑形成單位(wèi))；在細菌學中zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一(yī)次性地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液(yè)加好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴(kuò)增液和水浴(yù)鍋上進行變性-退火-延(yán)伸反(fǎn)應，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴(kuò)增(zēng)反應。擴增(zēng)產物一(yī)般用(yòng)電泳分析，不(bù)一定要用(yòng)同位素，無放射性汙染，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的純度要求低(dī)
不需要(yào)分離病毒或細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及(jí)總(zǒng)RNA均可作(zuò)為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板。可(kě)直(zhí)接用臨(lín)床標本如血液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發(fā)，細胞，活PCR技術(shù)概(gài)論(lùn)。
