產品中心(xīn)
核酸(suān)檢(jiǎn)測試劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬性(xìng)
| 產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
|
鴨源性(xìng)成分Cytb基因(yīn)(Duck-Cytb)檢測(cè)試劑盒 |
50T |
YS-P015591 |
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融。
運輸：低溫(wēn)，避光。
有效期：一年(nián)
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒的(dí)有效期(qī)一般為1年(nián)，這(zhè)是指(zhǐ)在適當(dāng)的(dí)儲存溫度(dù)下。核(hé)酸(suān)擴增部分的試劑(jì)一(yī)般要貯(zhù)存於-20℃下，產(chǎn)物檢測(cè)部分試(shì)劑則(zé)貯存於2-8℃。盡量避免反復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件(jiàn)設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值(zhí)綫設定在剛好超過正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質(zhì)控品擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應(yīng)為陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需在(zài)一(yī)次實(shí)驗中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足，否(fǒu)則該次實驗(yàn)視為(wéi)無效。
【結果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明顯的指數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為可疑(yí)樣本；對於可(kě)疑樣(yàng)本建(jiàn)議復核一次(cì)，若復(fù)核(hé)結果Ct<40且有指數擴增(zēng)期，則(zé)判(pàn)定為陽(yáng)性，否則判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指數擴增期(qī)，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性樣本。
【對檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1. 實(shí)驗室環境汙染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙染，樣品交(jiāo)叉汙(wū)染會出(chū)現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結(jié)果；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保存不(bù)當(dāng)或試劑(jì)配製(zhì)不準確(què)引起的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下降(jiàng)，可能(néng)會(huì)導致(zhì)出現假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特(tè)異性(xìng)：
②鹼基配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合成反應的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異性與(yǔ)保守性。
鴨(yā)源性(xìng)成分(fēn)Cytb基(jī)因(Duck-Cytb)檢測試劑(jì)盒(hé)其中引物與模板(bǎn)的(dí)正確結合是關鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模板(bǎn)的結合(hé)及引物鏈(liàn)的延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對原則(zé)的。聚(jù)合酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模板與(yǔ)引物(wù)的結合(hé)(復性)可以在較高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下(xià)進(jìn)行，結合的(dí)特異(yì)性大大增(zēng)加，被擴增(zēng)的(dí)靶基因片段(duàn)也就(jiù)能保持(chí)很高的正確度。再通過選擇特異(yì)性和(hé)保守(shǒu)性高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因區，其特異(yì)性程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成量是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板(bǎn)擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬個細胞(bāo)中檢(jiǎn)出一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病毒的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的靈敏度可(kě)達3個RFU(空斑形(xíng)成單位)；在細菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶，一次(cì)性地將反應液加好(hǎo)後，即在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液和(hé)水浴鍋(guō)上進行(háng)變(biàn)性(xìng)-退火-延伸反應，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴增產物一般(bān)用電(diàn)泳分(fēn)析，不(bù)一(yī)定要用同位素，無放(fàng)射性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純度(dù)要求低(dī)
不(bù)需要(yào)分(fēn)離(lí)病毒或(huò)細(xì)菌及(jí)培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總RNA均可(kě)作為擴(kuò)增模板。可直(zhí)接(jiē)用臨床(chuáng)標本如(rú)血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔液，洗嗽液，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活PCR技(jì)術概論。
