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核酸檢(jiǎn)測試(shì)劑盒

肉(ròu)毒杆菌E型(CB-E)核(hé)酸檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)

文字:[大][中][小(xiǎo)] 2024-3-19    瀏覽次數:791    
商(shāng)品(pǐn)屬性
產(chǎn)品名稱 規格(gé) 貨(huò)號(hào)
肉毒(dú)杆(gān)菌(jūn)E型(CB-E)核(hé)酸(suān)檢測試劑盒
50T
YS-P015532
分(fēn)類:PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
儲(chǔ)存(cún)條件:-20℃避光(guāng)保存,避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū):低溫,避光。
有(yǒu)效期:一(yī)年

貨期(qī):現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的有(yǒu)效期(qī)一般為(wéi)1年(nián),這(zhè)是指(zhǐ)在適當的儲(chǔ)存(cún)溫度下。核(hé)酸(suān)擴增部(bù)分(fēn)的(dí)試劑一般(bān)要貯存(cún)於(yú)-20℃下,產(chǎn)物檢測部(bù)分(fēn)試劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反(fǎn)復(fù)凍融。


【結(jié)果(guǒ)分析(xī)條件(jiàn)設定(dìng)】
u 基綫(Baseline)設定:應選擇(zé)該次實(shí)驗指(zhǐ)數擴(kuò)增前(qián)所有樣本熒光信號(hào)比較穩定的一(yī)段區域(所有(yǒu)樣(yàng)本熒光信(xìn)號無較大波(bō)動(dòng)),起始點(Start)應避(bì)開(kāi)熒光采(cǎi)集起始階段的(dí)信號(hào)波動,終止點(End)應(yīng)比最早出現(xiàn)指(zhǐ)數(shù)擴增的(dí)樣(yàng)本Ct值減(jiǎn)少1~3個(gè)循環,建議基綫設為6~15。
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng):將閾值(zhí)綫設定(dìng)在剛好(hǎo)超過正常(cháng)陰(yīn)性質控品擴增(zēng)曲綫的最高點。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準】
1.   陰性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的檢測結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陰性,無(wú)指數(shù)擴增期,Ct=40或無Ct;
2.   陽性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果應(yīng)為陽性(xìng),有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增期,Ct值應小於(yú)等於(yú)35;
3.   以上(shàng)要(yào)求需(xū)在一次實(shí)驗中同時(shí)滿(mǎn)足,否(fǒu)則(zé)該次(cì)實驗視(shì)為無(wú)效(xiào)。
【結果判斷(duàn)】
1.   陽(yáng)性(xìng):有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期,且(qiě)Ct<38;
2.可疑:有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴增(zēng)期(qī),且(qiě)38≤Ct<40,此時樣(yàng)本(běn)為可疑樣(yàng)本;對於可疑樣本建議復(fù)核一次(cì),若(ruò)復(fù)核結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指數擴增期,則(zé)判(pàn)定為陽性(xìng),否則判(pàn)定(dìng)為陰性;
3.   陰(yīn)性(xìng):無指數擴(kuò)增(zēng)期,Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結果的解(jiě)釋】
1.   實(shí)驗室環境汙染,試(shì)劑(jì)汙染(rǎn),樣品交(jiāo)叉汙(wū)染會出(chū)現假(jiǎ)陽性結果(guǒ);

2.   試(shì)劑(jì)運(yùn)輸(shū),保(bǎo)存不(bù)當或試劑配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確引起(qǐ)的試劑檢(jiǎn)測效能(néng)下(xià)降(jiàng),可能會(huì)導致(zhì)出(chū)現假陰(yīn)性結(jié)果(guǒ)。


PCR反(fǎn)應的(dí)特異性(xìng):
   ①引(yǐn)物與模(mó)板DNA特(tè)異正(zhèng)確的結合;
   ②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原(yuán)則;
   ③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成反應(yīng)的忠(zhōng)實性;
   ④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的(dí)特(tè)異性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
肉毒杆(gān)菌E型(xíng)(CB-E)核酸檢測試劑盒(hé)其(qí)中引物與模板(bǎn)的正(zhèng)確(què)結(jié)合是關鍵。引物與(yǔ)模板(bǎn)的結合及引物鏈的延伸(shēn)是遵循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反應(yīng)的忠實性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性(xìng),使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結合(復性)可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的溫度下(xià)進(jìn)行(háng),結(jié)合的(dí)特(tè)異性大大(dà)增加(jiā),被擴增(zēng)的(dí)靶基(jī)因片段也就能保(bǎo)持很高的正(zhèng)確度。再通(tōng)過(guò)選擇特(tè)異(yì)性和保(bǎo)守性高的(dí)靶基因(yīn)區(qū),其(qí)特異性程(chéng)度就更高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成量是(shì)以指數方式增(zēng)加(jiā)的,能將皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起始待測模板擴(kuò)增(zēng)到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶細胞(bāo);在(zài)病(bìng)毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中,PCR的(dí)靈敏度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢出(chū)率為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便,快速
PCR反應用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi),一次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加好(hǎo)後(hòu),即在(zài)DNA擴增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行變性-退火(huǒ)-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增反(fǎn)應(yīng)。擴增(zēng)產(chǎn)物一般(bān)用(yòng)電泳分(fēn)析,不(bù)一(yī)定(dìng)要(yào)用(yòng)同位素,無放射(shè)性汙染,易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度要(yào)求低
不需要分離病毒(dú)或(huò)細(xì)菌(jūn)及(jí)培(péi)養(yǎng)細胞,DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均(jūn)可作(zuò)為擴(kuò)增模板(bǎn)。可(kě)直接用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本如血液(yè),體腔(qiāng)液,洗嗽液,毛發(fā),細胞,活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論。
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