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核酸檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬性
| 產品名(míng)稱(chēng) | 規格(gé) | 貨(huò)號(hào) |
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對(duì)蝦桃(táo)拉病毒(dú)(TSV)核酸檢測(cè)試(shì)劑盒(hé) |
50T |
YS-P015484 |
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避免反復凍融(róng)。
運輸：低(dī)溫，避(bì)光。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年(nián)
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期一般為1年，這是(shì)指在適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下。核(hé)酸擴(kuò)增部(bù)分的(dí)試劑(jì)一般(bān)要貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測部(bù)分(fēn)試(shì)劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量避免反(fǎn)復凍融。
【結果分析(xī)條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值(zhí)綫(xiàn)設定在(zài)剛好超(chāo)過正常陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴增曲綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性質控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性(xìng)，有明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需(xū)在(zài)一次實驗中同(tóng)時滿足(zú)，否(fǒu)則(zé)該次實驗視為(wéi)無效(xiào)。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可疑(yí)樣本(běn)；對於(yú)可(kě)疑(yí)樣本建議(yì)復(fù)核一(yī)次(cì)，若復核結果Ct<40且有(yǒu)指數擴(kuò)增(zēng)期，則(zé)判定為(wéi)陽性，否則(zé)判定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環境汙(wū)染，試劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉汙(wū)染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試劑運輸(shū)，保存(cún)不(bù)當或試(shì)劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準確引起的(dí)試(shì)劑(jì)檢測(cè)效能(néng)下(xià)降(jiàng)，可(kě)能會導致出現假(jiǎ)陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特(tè)異性：
②鹼基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特(tè)異(yì)性與(yǔ)保守性。
對蝦桃(táo)拉病毒(TSV)核酸(suān)檢測試(shì)劑盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確結合是關鍵。引物與(yǔ)模板(bǎn)的結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈的(dí)延伸是(shì)遵(zūn)循鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反應的(dí)忠實性及Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性，使反(fǎn)應中(zhōng)模板(bǎn)與引(yǐn)物(wù)的結合(復(fù)性)可(kě)以(yǐ)在較(jiào)高的溫度下(xià)進(jìn)行，結合(hé)的特(tè)異性大大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段(duàn)也(yě)就能保持(chí)很高(gāo)的(dí)正(zhèng)確(què)度。再(zài)通(tōng)過選擇(zé)特(tè)異性(xìng)和保守性(xìng)高的靶基因(yīn)區，其(qí)特(tè)異性(xìng)程(chéng)度就更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成(chéng)量是以指(zhǐ)數方(fāng)式增加(jiā)的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的起始待(dài)測(cè)模板擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒的(dí)檢測(cè)中(zhōng)，PCR的靈敏度(dù)可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位)；在細菌學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一次性地將(jiāng)反應(yīng)液(yè)加(jiā)好後，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進行變性-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一(yī)般(bān)用電泳分析，不一定(dìng)要(yào)用同位(wèi)素，無放射(shè)性汙(wū)染，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純度要求低(dī)
不需(xū)要分離病毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品及總RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模(mó)板。可直(zhí)接用臨床標本如血液，體腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
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