產(chǎn)品(pǐn)中心(xīn)
核(hé)酸檢測(cè)試劑盒
小(xiǎo)反芻(chú)獸疫通(tōng)用型/疫苗(miáo)株/野(yě)毒株(zhū)(PPR-U/ PPR-V/ PPR-W)三(sān)重核酸檢測(cè)試劑(jì)盒
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 規格 | 貨號 |
|
小反(fǎn)芻獸(shòu)疫通(tōng)用型/疫苗(miáo)株/野毒(dú)株(zhū)(PPR-U/ PPR-V/ PPR-W)三(sān)重核酸(suān)檢測試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015642 |
儲(chǔ)存條(tiáo)件:-20℃避光保存,避免(miǎn)反復凍融。
運輸:低(dī)溫,避(bì)光。
有效(xiào)期:一年(nián)
貨(huò)期:現貨PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的(dí)有效期一般(bān)為(wéi)1年,這(zhè)是(shì)指在(zài)適當的儲(chǔ)存溫度(dù)下。核酸擴(kuò)增部(bù)分的試(shì)劑(jì)一般要貯存(cún)於-20℃下(xià),產物檢測(cè)部分試(shì)劑則貯存於2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融。

u 閾值(Threshold)設定:將(jiāng)閾值綫(xiàn)設(shè)定在剛好超(chāo)過正(zhèng)常陰性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增(zēng)曲綫的最高點。
2. 陽(yáng)性質控品的檢(jiǎn)測結果應為陽性,有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期,Ct值應小於(yú)等於35;
3. 以上要求需(xū)在(zài)一次(cì)實驗中同時(shí)滿(mǎn)足,否(fǒu)則該次實驗(yàn)視為無效(xiào)。
2.可(kě)疑:有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期(qī),且38≤Ct<40,此(cǐ)時樣(yàng)本(běn)為(wéi)可疑樣本;對於可(kě)疑樣(yàng)本建議復核(hé)一次,若復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數擴(kuò)增(zēng)期,則(zé)判(pàn)定為陽(yáng)性,否則判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng);
3. 陰性:無指數(shù)擴增期,Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰性樣本。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實驗室環(huán)境汙染,試(shì)劑(jì)汙染,樣品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會(huì)出現假陽性結果;
2. 試劑運輸,保存(cún)不(bù)當或試劑配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確引起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下(xià)降(jiàng),可(kě)能會導致(zhì)出(chū)現假陰(yīn)性結果。

②鹼基配對原則;
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因(yīn)的特異性與保守(shǒu)性(xìng)。
小(xiǎo)反(fǎn)芻(chú)獸疫通用型/疫苗(miáo)株/野毒株(zhū)(PPR-U/ PPR-V/ PPR-W)三(sān)重核酸(suān)檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)其中引物(wù)與模板(bǎn)的正確結合(hé)是關(guān)鍵。引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的(dí)結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈的(dí)延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則的。聚合(hé)酶合成(chéng)反應(yīng)的忠實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫(wēn)性,使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模板(bǎn)與引物(wù)的結(jié)合(hé)(復(fù)性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的溫度(dù)下(xià)進行(háng),結合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性大大增(zēng)加(jiā),被擴增(zēng)的靶基因片(piàn)段也就能保持(chí)很高的正確(què)度。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇(zé)特(tè)異(yì)性和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基因區,其(qí)特(tè)異(yì)性程度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的生成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指數方式增(zēng)加的,能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢(jiǎn)出(chū)一個靶(bǎ)細(xì)胞;在病毒(dú)的檢測中,PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達(dá)3個RFU(空斑(bān)形成(chéng)單(dān)位);在(zài)細菌學中(zhōng)zui小檢出率為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便,快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶,一(yī)次性地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液加好後,即在DNA擴增(zēng)液(yè)和水浴鍋(guō)上進行變(biàn)性-退(tuì)火-延伸反應,一(yī)般在(zài)2~4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增反(fǎn)應(yīng)。擴增(zēng)產物一(yī)般用(yòng)電泳(yǒng)分析(xī),不一定(dìng)要(yào)用(yòng)同位(wèi)素,無放(fàng)射性汙染,易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度(dù)要求低
不(bù)需要(yào)分(fēn)離(lí)病毒(dú)或細菌及培(péi)養(yǎng)細胞,DNA 粗(cū)製品及總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為擴增模板。可直(zhí)接(jiē)用臨床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液(yè),體(tǐ)腔(qiāng)液,洗嗽液(yè),毛發,細胞(bāo),活PCR技術(shù)概論。
