大(dà)鼠關節軟(ruǎn)骨(gǔ)細胞

大(dà)鼠關節(jié)軟(ruǎn)骨細胞分(fēn)離自關(guān)節軟骨組織；關節軟(ruǎn)骨屬(shǔ)於透明(míng)軟(ruǎn)骨(gǔ)，表麵(miàn)光滑(huá)，呈淡(dàn)藍色(sè)，有(yǒu)光(guāng)澤(zé)，它(tā)是由(yóu)一種特(tè)殊的(dí)叫做致密(mì)結(jié)締(dì)組(zǔ)織的(dí)膠原纖(xiān)維(wéi)構成(chéng)的基本框架，這種(zhǒng)框架(jià)呈半環形，類似(sì)拱(gǒng)形(xíng)球(qiú)門，其底端(duān)緊(jǐn)緊附著在下麵(miàn)的骨質上，上端(duān)朝(zhāo)向關(guān)節麵，這(zhè)種結(jié)構使關節軟骨緊(jǐn)緊(jǐn)與骨結(jié)合起來(lái)而(ér)不(bù)會掉下來(lái)，同(tóng)時當受(shòu)到壓(yā)力(lì)時候，還可以有(yǒu)少許(xǔ)的變形，起到緩(huǎn)衝(chōng)壓力的作(zuò)用。在(zài)這些纖(xiān)維之間(jiān)，散在(zài)分布著軟骨細胞，軟骨細胞(bāo)由淺層向(xiàng)深層(céng)逐漸由(yóu)扁(biǎn)平(píng)樣至橢圓或圓(yuán)形的細(xì)胞(bāo)組(zǔ)成，這些(xiē)軟(ruǎn)骨細胞維持關節軟(ruǎn)骨的(dí)正常代(dài)謝。關節(jié)軟(ruǎn)骨沒(méi)有(yǒu)神經(jīng)支配(pèi)，也沒有(yǒu)血(xiě)管，其營(yíng)養(yǎng)成分(fēn)必(bì)須從關節(jié)液中取得，而其代(dài)謝廢(fèi)物也必須排(pái)至(zhì)關(guān)節(jié)液中，關(guān)節(jié)軟(ruǎn)骨的(dí)這種營(yíng)養代謝(xiè)必須通過(guò)關節運動，使關節(jié)軟骨不斷(duàn)的受到(dào)壓(yā)力刺(cì)激(jī)才行(háng)，所(suǒ)以關節(jié)運(yùn)動(dòng)對(duì)於維持關(guān)節(jié)軟(ruǎn)骨的(dí)正常結構起重(zhòng)要的作用(yòng)。關節軟(ruǎn)骨細胞位(wèi)於關(guān)節軟(ruǎn)骨陷(xiàn)窩(wō)內(nèi)。幼稚(zhì)的(dí)關(guān)節軟骨(gǔ)細胞(bāo)位(wèi)於關(guān)節(jié)軟骨(gǔ)組(zǔ)織的表(biǎo)層，單(dān)個分布(bù)，體積(jī)較(jiào)小(xiǎo)，呈(chéng)橢(tuǒ)圓(yuán)形(xíng)，長軸(zhóu)與關(guān)節軟骨(gǔ)表麵(miàn)平行，越(yuè)向(xiàng)深層的關(guān)節軟骨(gǔ)細(xì)胞體積(jī)之(zhī)間(jiān)增(zēng)大呈圓(yuán)形，細(xì)胞(bāo)核(hé)圓(yuán)形或(huò)卵圓(yuán)形，染(rǎn)色淺(qiǎn)，細(xì)胞質弱(ruò)嗜鹼(jiǎn)性，常見數量不一的脂(zhī)滴。成熟(shú)的(dí)關節軟骨細胞多2-8個成(chéng)群分布(bù)於關(guān)節(jié)軟骨陷(xiàn)窩內，這些(xiē)關(guān)節軟(ruǎn)骨(gǔ)細(xì)胞由同(tóng)一個(gè)母細胞分裂(liè)增殖(zhí)而成，稱為同源細胞群。電鏡(jìng)下，關節軟骨細(xì)胞有突(tū)起和(hé)皺(zhòu)褶，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大(dà)量的粗麵(miàn)內(nèi)質(zhì)網和(hé)發(fā)達的高爾基(jī)復(fù)合體(tǐ)及少量的(dí)綫粒體。在組織(zhī)切片(piàn)中(zhōng)，關節軟骨細胞收縮(suō)為不規則(zé)形(xíng)，在軟骨囊(náng)和細胞(bāo)之間(jiān)出現較大的(dí)腔隙。體外(wài)培養的關節(jié)軟骨(gǔ)細(xì)胞(bāo)對於研究其生理(lǐ)功(gōng)能(néng)，藥(yào)物作用(yòng)以(yǐ)及各種致病(bìng)因(yīn)素作用下的病理生理(lǐ)改變(biàn)具重要(yào)意義(yì)。

自備(bèi)試(shì)劑： 0.25%胰蛋(dàn)白酶  ，PBS  ，完全培養(yǎng)基(jī)

培養基： 大(dà)鼠關(guān)節軟(ruǎn)骨細胞完(wán)全(quán)培養(yǎng)基(jī)(含FBS，生長添(tiān)加劑(jì)，Penicillin，Streptomycin等)

換液頻(pín)率： 每(měi)3-4天(tiān)換(huàn)液(yè)一(yī)次(cì)

生長特性： 貼(tiē)壁(bì)生長(cháng)

細胞形(xíng)態： 梭形，多(duō)角形

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)最(zuì)佳(jiā)

消(xiāo)化液(yè)： 0.25%胰(yí)蛋(dàn)白(bái)酶(méi)

大鼠關節軟骨(gǔ)細(xì)胞體外培(péi)養(yǎng)周期有限；建(jiàn)議(yì)使用配套的專(zhuān)用(yòng)生長培養基及正(zhèng)確的(dí)操(cāo)作方(fāng)法(fǎ)來培養，以此保證(zhèng)該細胞(bāo)的最佳培養(yǎng)狀(zhuàng)態(tài)。

方(fāng)法(fǎ)簡介 實(shí)驗(yàn)室分(fēn)離的(dí)大鼠關節(jié)軟骨(gǔ)細(xì)胞采用膠原酶(méi)聯合中性蛋白酶消化(huà)製備(bèi)而來(lái)，細胞(bāo)總量(liáng)約為5×10⁵ cells/瓶。

質(zhì)量(liáng)檢測 實驗室(shì)分離(lí)的(dí)大(dà)鼠關節(jié)軟(ruǎn)骨細胞經Ⅱ型膠(jiāo)原(yuán)蛋白免(miǎn)疫熒光鑒(jiàn)定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1，HBV，HCV，支原(yuán)體(tǐ)，細菌，酵母和真(zhēn)菌等。