團(tuán)頭(tóu)魴尾鰭(qí)細(xì)胞培(péi)養(yǎng)相(xiāng)關(guān)需求，以(yǐ)下是汙(wū)染後的(dí)針對性(xìng)挽救方案，適配該魚類(lèi)細胞的生長特性(xìng)。
一(yī)，汙(wū)染程度分級判(pàn)斷(duàn)
‌輕(qīng)度汙(wū)染(rǎn)‌：僅鏡下觀察到(dào)少量雜菌(jūn)，培(péi)養(yǎng)液澄(chéng)清無(wú)明顯渾濁(zhuó)，細胞(bāo)貼(tiē)壁狀(zhuàng)態(tài)尚(shàng)可。
‌重度汙染‌：培養液(yè)快速(sù)渾(hún)濁(zhuó)變(biàn)黃，大量雜菌(jūn)漂浮(fú)，細胞大(dà)麵(miàn)積(jī)脫落死亡。
二，不(bù)同(tóng)汙染程(chéng)度(dù)挽救操作(zuò)
‌輕度(dù)汙染針對性處理(lǐ)‌
立即吸除(chú)全(quán)部(bù)汙染(rǎn)培(péi)養液，用(yòng)無菌PBS輕柔(róu)衝洗細胞3~5次，盡可能衝(chōng)去表麵附著的汙染物。
更(gēng)換含(hán)高(gāo)濃(nóng)度(dù)雙(shuāng)抗的新鮮完全(quán)培養基(jī)，將(jiāng)細(xì)胞置於(yú)25℃培養箱中靜(jìng)置培養，24小時內(nèi)不(bù)要移(yí)動培養瓶。
後(hòu)續連續傳代2~3次，每(měi)次(cì)傳(chuán)代(dài)時仍維(wéi)持雙(shuāng)抗(kàng)添加(jiā)量，逐(zhú)步(bù)降低(dī)汙染物(wù)濃度(dù)直(zhí)至完(wán)全清除。
‌重度汙染(rǎn)止損(sǔn)操作(zuò)‌
若(ruò)細(xì)胞(bāo)汙染(rǎn)嚴(yán)重，大(dà)量(liáng)脫(tuō)落，第一時(shí)間將汙(wū)染培養瓶密封(fēng)後高(gāo)壓(yā)滅(miè)菌(jūn)丟棄(qì)，避(bì)免(miǎn)汙染擴散至(zhì)其(qí)他(tā)細胞係。
對超淨台(tái)，培養箱(xiāng)等(děng)接(jiē)觸過(guò)的區(qū)域(yù)全麵(miàn)消毒(dú)，從提(tí)前(qián)凍存的(dí)低(dī)代次種子細胞中復蘇新(xīn)的(dí)團(tuán)頭魴尾(wěi)鰭(qí)細胞，重(zhòng)新建(jiàn)立培養(yǎng)體係。
‌特(tè)殊挽救備(bèi)選方案‌
針對珍(zhēn)貴(guì)不可替代的(dí)細胞，可(kě)將汙(wū)染細胞懸(xuán)液通過(guò)0.22μm孔徑濾(lǜ)膜過濾，分離(lí)細胞(bāo)與(yǔ)遊離微生物(wù)後重新接種培(péi)養。
操作(zuò)復雜場(cháng)景(jǐng)下(xià)，可(kě)將(jiāng)細胞接(jiē)種至免疫(yì)缺陷動(dòng)物(wù)體內(nèi)，借助動物自(zì)身免(miǎn)疫係統清(qīng)除汙染物後(hòu)再分離回收細胞(bāo)。
三(sān)，挽(wǎn)救後恢復優化
傳(chuán)代後前(qián)2次(cì)采(cǎi)用1:2的(dí)低(dī)密(mì)度傳(chuán)代，給細(xì)胞(bāo)留出(chū)充足的恢復空(kōng)間(jiān)。
待細胞(bāo)形態完(wán)全(quán)恢(huī)復(fù)均一(yī)，無任(rèn)何汙(wū)染物殘留(liú)後，再(zài)轉(zhuǎn)回(huí)常(cháng)規無(wú)抗(kàng)培(péi)養(yǎng)條(tiáo)件。