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技(jì)術(shù)文(wén)獻(xiàn)

放免(miǎn)的(dí)原(yuán)理具(jù)體(tǐ)是什麼,檢(jiǎn)測靈(líng)敏度是多少(shǎo)?

文字(zì):[大(dà)][中][小] 2019-6-26    瀏覽次(cì)數(shù):1010    

透明(míng)質酸A使用(yòng)什(shí)麼(mó)檢(jiǎn)測方(fāng)法更精確(què)

透明質酸(suān)A在(zài)大(dà)多數情況(kuàng)下(xià)都是(shì)選擇用(yòng)放(fàng)射(shè)免(miǎn)疫(yì)的方(fāng)法來檢(jiǎn)測,包(bāo)括臨(lín)床(chuáng)上(shàng)也(yě)經常(cháng)選擇使(shǐ)用放免(miǎn)的方法來測透明質(zhì)酸(suān)A,那麼(mó)放免的原理(lǐ)具體是什麼,檢測靈(líng)敏度是多(duō)少?


透明(míng)質(zhì)酸(suān)(Hyaluronic Acid, HA)是(shì)一種廣(guǎng)泛(fàn)存在於(yú)細胞(bāo)外基質(zhì)中的(dí)高(gāo)分(fēn)子(zǐ)多糖,主要由(yóu)肝內皮(pí)細胞進行降(jiàng)解。肝(gān)組(zǔ)織正常(cháng)結構受(shòu)到(dào)損傷(shāng)時,一(yī)方麵 HA 的(dí)合(hé)成增加,另(lìng)一(yī)方(fāng)麵肝(gān)髒對 HA 的降(jiàng)解(jiě)能力(lì)下降,導(dǎo)致血(xiě)清(qīng)中(zhōng) HA 水平(píng)明顯增(zēng)高,並(bìng)且增(zēng)高的程度與肝組織炎症及纖維(wéi)化(huà)程度(dù)呈正相關(guān)。


急性肝炎(yán),慢性活(huó)動性肝(gān)炎(yán),肝(gān)硬化(huà)以(yǐ)及(jí)肝(gān)癌(ái)都導致(zhì)血清 HA 水(shuǐ)平增高,某(mǒu)些(xiē)惡(è)性(xìng)腫(zhǒng)瘤(liú),肺(fèi)心(xīn)病患者(zhě)的血清 HA 水平(píng)也(yě)會(huì)增高。慢性(xìng)肝炎在(zài)用(yòng)幹擾素(sù)或(huò)激素進行(háng)治(zhì)療(liáo)時,伴有(yǒu)血(xiě)清(qīng) HA 水平(píng)下調。胚胎(tāi)兒血清(qīng) HA 極(jí)高,新(xīn)生兒血(xiě)清(qīng) HA 仍(réng)維持(chí)在(zài)較高(gāo)水(shuǐ)平,隨著(zhuó)年齡(líng)增長血(xiě)清 HA 逐漸降(jiàng)低,到中(zhōng),老年(nián)又略有(yǒu)升(shēng)高(gāo)。


血清(qīng) HA 水(shuǐ)平是(shì)反映肝(gān)纖維(wéi)化的(dí)重(zhòng)要指標,也(yě)可用於抗(kàng)纖(xiān)維化(huà)藥(yào)物治療時(shí)的動態(tài)觀(guān)察(chá)。




本方(fāng)法采用競(jìng)爭(zhēng)放(fàng)射免疫分析(xī)法(fǎ),即標(biāo)準或待測(cè)樣品(pǐn)中的(dí) HA 和(hé)125I-HA 共同(tóng)與限量的(dí)透明質酸結合(hé)蛋(dàn)白(bái)(Hyaluronic Acid BindingProtein, HABP)在適宜的條件(jiàn)下進(jìn)行(háng)競爭性(xìng)結(jié)合反(fǎn)應。一(yī)部(bù)分 125I-HA125與 HABP 結(jié)合形成(chéng)復(fù)合(hé)物,而另一(yī)部(bù)分呈遊離(lí)狀態。 I-HA 與(yǔ) HABP


結合的(dí)比(bǐ)例取決於標準(zhǔn)或待測(cè)樣品中(zhōng)非標記 HA 的含(hán)量(liáng),非標(biāo)記 HA的(dí)含量(liáng)越(yuè)高(gāo),125I-HA 與 HABP 形成的(dí)復(fù)合物越少。HA-HABP 復(fù)合物(wù)與 HABP 抗(kàng)體和第(dì)二抗體形(xíng)成交(jiāo)聯(lián)的(dí)聚(jù)合(hé)物沉澱下(xià)來,測(cè)定沉(chén)澱(diàn)物的(dí)放射(shè)性計數(shù)。經過適(shì)當(dāng)的數據處理後可獲(huò)得(dé)標(biāo)準(zhǔn)曲綫,從(cóng)標準(zhǔn)曲綫(xiàn)


上查(chá)出被測樣品(pǐn)的(dí) HA 含(hán)量(liáng)(數據可由計算(suàn)機(jī)自(zì)動(dòng)處理)。


【適(shì)用(yòng)儀器(qì)】


適(shì)用於(yú)各類(lèi)γ-放(fàng)射(shè)免(miǎn)疫(yì)分析儀。


【血樣(yàng)處(chǔ)理(lǐ)】


取(qǔ)靜(jìng)脈血分(fēn)離血(xiě)清,48 小時內測(cè)量可(kě)在 2~8℃密閉保存(cún);超(chāo)過(guò) 48


小(xiǎo)時-20℃密(mì)閉冷凍保(bǎo)存,至少穩(wěn)定 2 個(gè)月,但要避免(miǎn)反復凍融(róng)。


【本藥盒(hé)的(dí)主(zhǔ)要技術(shù)指標 】


1. 測定範圍:25~800ng/ml;


2. 靈敏(mǐn)度:5.5ng/ml;


3. 精密度:批(pī)內變異 CV<10%;批間(jiān)變異(yì) CV<15%。


【注意事項】收到藥盒(hé)後盡快(kuài)存(cún)放在(zài) 2-8℃保存,使用(yòng)前應平衡(héng)至(zhì)室(shì)


溫,加(jiā)試劑前必須搖(yáo)匀(yún)。


1. 操作前(qián)請仔細(xì)閱(yuè)讀(dú)說明(míng)書(shū),不同批(pī)號(hào)的試(shì)劑(jì)不(bù)得混用(yòng)。


2. 加樣操作應(yīng)快速準(zhǔn)確(què)手法(fǎ)一(yī)致,盡量縮(suō)短(duǎn)整(zhěng)個(gè)加樣(yàng)時(shí)間(jiān)。一


批測(cè)定(dìng)中(zhōng)管數(shù)不宜過多(duō),以加(jiā)入 HABP 前(qián)後管(guǎn)相差在(zài) 5 分(fēn)鐘


內(nèi)為(wéi)宜,嚴格(gé)控(kòng)製(zhì)每(měi)步(bù)反應(yīng)的(dí)時間和溫度(dù)。


3. 加(jiā)樣(yàng)頭不可(kě)混(hùn)用,以(yǐ)免(miǎn)交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染。


4. 加(jiā)標準(zhǔn)品,質控或樣品(pǐn)時(shí)注意(yì)將樣(yàng)本加(jiā)到(dào)試管(guǎn)底部;加(jiā)標記


物時(shí)加(jiā)樣頭(tóu)不(bù)要(yào)碰到液麵(miàn);加抗(kàng)體時加(jiā)樣頭應在液(yè)麵之上約(yuē)


1cm 以(yǐ)免(miǎn)交叉汙染。


5. 溫(wēn)浴之(zhī)前應充(chōng)分混(hùn)合(hé)均匀

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