馬(mǎ)鏈(liàn)球菌馬亞(yà)種(zhǒng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)樣(yàng)品收集，處理及(jí)保(bǎo)存方(fāng)法：
1. 血清：使用不(bù)含(hán)熱原(yuán)和內(nèi)毒(dú)素的(dí)試管，操(cāo)作過程(chéng)中(zhōng)避(bì)免任何細(xì)胞(bāo)刺(cì)激，收集血(xiě)液後，3000 轉離心10 分鐘(zhōng)將(jiāng)血(xiě)清和(hé)紅(hóng)細(xì)胞迅(xùn)速小心地分離(lí)。
2. 血漿(jiāng)：EDTA，檸檬酸鹽或肝(gān)素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心(xīn)30 分鐘(zhōng)取上清。
3. 細(xì)胞(bāo)上清(qīng)液：16人(rén)鼻病(bìng)毒16PCR檢測(cè)試劑盒(hé)廠(chǎng)家(jiā)3000 轉(zhuǎn)離(lí)心10 分鐘去除顆粒和聚(jù)合(hé)物(wù)。
4. 組織(zhī)匀漿：將組織加(jiā)入適量生理(lǐ)鹽水(shuǐ)搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分(fēn)鐘(zhōng)取上清。
5. 保存(cún)：如果樣本收(shōu)集後不及時(shí)檢測，請按(àn)一(yī)次用量分裝，凍(dòng)存於(yú)-20℃，避(bì)免反復凍(dòng)融，在(zài)室溫下解凍並確保樣品(pǐn)均匀(yún)地充(chōng)分(fēn)解凍。
需要自備的(dí)器材：
1．產品(pǐn)僅(jǐn)用(yòng)於科研儀(yí)器：分(fēn)析天平，離(lí)心機，熒光 PCR 擴(kuò)增(zēng)儀(yí)，組(zǔ)織研磨(mó)器(qì)，-20 ℃冰箱(xiāng)，可調移液(yè)器(qì)（2 µL，20
µL，200 µL，1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 專(zhuān)用(yòng)反(fǎn)應(yīng)管，眼科剪(jiǎn)，眼科(kē)鑷，生理鹽水，1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二(èr)乙酯（DEPC）水
處理(lǐ)的(dí)滅(miè)菌離(lí)心(xīn)管(guǎn)，吸頭（10 µL，200 µL，1000 µL），滅(miè)菌雙蒸水。
特點：
1.廠(chǎng)家(jiā)即開即用(yòng)，用戶隻(zhī)需(xū)要(yào)提供(gōng)樣品 DNA 模(mó)板，操(cāo)作簡(jiǎn)單(dān)，定量(liáng)準確(què)快速。
2. 引(yǐn)物(wù)經(jīng)過優化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 後(hòu)可以直接上(shàng)樣電泳(yǒng)。
4. 提(tí)供陽(yáng)性對照，便(biàn)於(yú)分析試驗(yàn)結果。操作流(liú)程：
1.整(zhěng)個檢測過(guò)程應嚴(yán)格(gé)按照本(běn)說(shuō)明書要(yào)求(qiú)分(fēn)別在試劑(jì)準(zhǔn)備區，樣(yàng)本(běn)處理(lǐ)區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服(fú)，儀器，耗(hào)材(cái)應獨(dú)立使(shǐ)用(yòng)，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸(xī)頭(tóu)采用帶濾芯(xīn)吸頭(tóu)；樣(yàng)本處理區應配有(yǒu)生(shēng)物(wù)安全(quán)櫃，樣本處理在(zài)生物安全(quán)櫃(guì)中進(jìn)行(háng)操作(zuò)；三(sān)個(gè)區(qū)應該配有紫(zǐ)外綫殺(shā)菌裝置(zhì)。
2.為(wéi)避(bì)免(miǎn)RNA降解(jiě)，樣本處(chǔ)理(lǐ)過程(chéng)應(yīng)在0-4℃條件(jiàn)下操作(zuò)，且(qiě)完成(chéng)實驗後立(lì)即上機(jī)檢測；樣本處(chǔ)理過(guò)程(chéng)中使(shǐ)用(yòng)的(dí)器具(jù)耗材應經過(guò)無核酶(méi)處理(lǐ)。
3.每次實(shí)驗應該設(shè)置(zhì)陰(yīn)，陽性(xìng)對照。
4.試(shì)劑(jì)盒(hé)所(suǒ)有(yǒu)試(shì)劑(jì)在(zài)使用前(qián)應(yīng)該(gāi)在(zài)常(cháng)溫(wēn)下充分融化混匀，並應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑(jì)盒內所配陰性(xìng)和(hé)陽性對(duì)照在一次(cì)使用(yòng)前應(yīng)全(quán)部轉移至標本準(zhǔn)備區，並單(dān)獨存放(fàng)。
6.為防止熒光(guāng)幹擾，應避(bì)免(miǎn)裸手直接(jiē)接(jiē)觸PCR反(fǎn)應管，並(bìng)應避免在PCR反應管(guǎn)上進(jìn)行任何標記。
7.儀器擴增相(xiāng)關參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關要求(qiú)進行設(shè)置(zhì)；不(bù)同(tóng)批(pī)號試劑(jì)不能(néng)混用(yòng)。
8. ABI係列熒(yíng)光定量(liáng)PCR儀參(cān)數設置(zhì)中不(bù)選ROX校正，淬滅基因(yīn)選擇(zé)None。
9.實(shí)驗過程中產品(pǐn)的(dí)廢(fèi)棄(qì)物應該進(jìn)行(háng)無害化(huà)處理後方(fāng)可丟棄(qì)。