上海研生實業(yè)大(dà)鼠血管組(zǔ)織提取物(wù)實驗(yàn)報告：
一，分離與培養：
1，無(wú)菌條件下(xià)，取出(chū)1-3d 齡(líng)SD大(dà)鼠心(xīn)房組織(zhī)，然後用PBS將此組織塊清洗(xǐ)2次(cì)，後將組織(zhī)剪(jiǎn)成(chéng)1mm3左(zuǒ)右大小(xiǎo)
；
2，往(wǎng)組(zǔ)織塊(kuài)中加(jiā)入4 mL酶消(xiāo)化液(yè)（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶(méi)），混(hùn)懸10s，置(zhì)37℃條件下消化10min，之後(hòu)用滴管吹打製成(chéng)單細胞(bāo)懸(xuán)液，自然(rán)沉澱(diàn)並收集上清(qīng)，用含(hán)10% FBS培(péi)養基(jī)終止(zhǐ)消化後(hòu)4℃放置
；
3，剩(shèng)下的(dí)組織(zhī)再加入3～4mL酶消(xiāo)化(huà)液(yè)，混懸10s，置(zhì)37℃消化(huà)10 min後，按上述(shù)方(fāng)法(fǎ)收集(jí)上(shàng)清並(bìng)終(zhōng)止消(xiāo)化(huà)後4℃放(fàng)置，重(zhòng)復此步驟2-3次，直(zhí)至組織(zhī)完全(quán)被(bèi)消化(huà)
；
4，用200目不鏽鋼(gāng)篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消(xiāo)化液，1200r/min 離(lí)心(xīn)10min，棄(qì)去上(shàng)清(qīng)，沉(chén)澱細胞用含(hán)有10％ FBS DMEM/F12培養基混(hùn)懸，接(jiē)種(zhǒng)於25cm2培養(yǎng)瓶(píng)，放(fàng)置於(yú)37℃ ，5％CO2 培養箱中培(péi)養
；
5，差(chà)速貼(tiē)壁1h後(hòu)，吸出(chū)培養基(jī)，按實驗(yàn)需(xū)要接(jiē)種於6孔板中繼(jì)續培養
；

   

二(èr)，免疫熒光(guāng)鑒(jiàn)定：

1，待心房(fáng)肌(jī)細胞生長至(zhì)80%融(róng)合(hé)時(shí)，棄去(qù)培養(yǎng)基，用溫(wēn)育的(dí)PBS衝(chōng)洗(xǐ)細胞2次(cì)，每次(cì)10min，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固(gù)定(dìng)細胞15min
；
2，PBS衝洗(xǐ)細胞2次，每次(cì)10min，然後在4℃條件下(xià)，用0.1％Triton X-100透膜15min
；
3，PBS衝(chōng)洗細胞2次，每(měi)次10min，然後(hòu)在室(shì)溫(wēn)條(tiáo)件下，用(yòng)4% BSA封閉細(xì)胞(bāo)30min
；
4，按1: 100的(dí)比例(lì)稀釋α-actin一抗，然後將其(qí)放在4℃冰箱中(zhōng)孵育細胞(bāo)過夜
；
5，PBS衝洗細(xì)胞(bāo)3次，每次10min，按1：150的比(bǐ)例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件(jiàn)下放置1h
；
6，用PBS衝(chōng)洗(xǐ)3次，每次(cì)10min，後在(zài)倒置(zhì)熒光(guāng)顯微鏡(jìng)下觀察圖(tú)像並拍照。
人神經(jīng)星形(xíng)膠質細胞完全培養基
人(rén)神(shén)經(jīng)小膠質(zhì)細胞完全培(péi)養基(jī)
人(rén)腦(nǎo)微血管(guǎn)內(nèi)皮(pí)細胞完全培(péi)養(yǎng)基
人腦成(chéng)纖維(wéi)細(xì)胞(bāo)完全培(péi)養(yǎng)基(jī)
人小腦顆(kē)粒(lì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基
人(rén)晶狀體上皮(pí)細(xì)胞(bāo)完全(quán)培養基
人角(jiǎo)膜(mó)上皮細(xì)胞完(wán)全培(péi)養基(jī)
人視(shì)網膜色素(sù)上皮(pí)細胞完全培養基
人視網膜微血管內皮細(xì)胞完全(quán)培養(yǎng)基(jī)
人(rén)角(jiǎo)膜(mó)成(chéng)纖(xiān)維細胞完(wán)全培(péi)養(yǎng)基(jī)
人小梁網細(xì)胞完全(quán)培養(yǎng)基
人(rén)視網膜muller細(xì)胞完(wán)全培(péi)養(yǎng)基
人(rén)角膜(mó)內(nèi)皮細胞完全培養基(jī)
人脈絡膜微血管細(xì)胞(bāo)完全(quán)培養(yǎng)基(jī)
人牙周膜成(chéng)纖維(wéi)細胞完(wán)全培養基
大鼠肺(fèi)微血(xiě)管內(nèi)皮(pí)細胞(bāo)完(wán)全(quán)培(péi)養(yǎng)基
大鼠(shǔ)肺血管平滑(huá)肌(jī)細胞完全培養基(jī)
大鼠(shǔ)Ⅱ型(xíng)肺(fèi)泡(pào)上皮(pí)細胞(bāo)完全培(péi)養基
大鼠氣管上皮(pí)細胞(bāo)完(wán)全(quán)培養基
大(dà)鼠(shǔ)氣管平滑(huá)肌細胞完(wán)全培養(yǎng)基(jī)