眼(yǎn)蜱通用探針法熒(yíng)光PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒反(fǎn)應的特異性(xìng)決(jué)定因(yīn)素：
1.引物與模(mó)板DNA特(tè)異正確(què)的(dí)結(jié)合。
2.鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則(zé)。
3. Tag DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的忠實性。
4.靶(bǎ)基因的特(tè)異性與保(bǎo)守性(xìng)。
其中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的正(zhèng)確結(jié)合是關鍵。引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的(dí)結(jié)合(hé)及引物(wù)鏈(liàn)的延(yán)伸是遵循鹼基配對原(yuán)則的。聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應的忠實性及(jí) Tag DNA聚(jù)合醇耐(nài)高溫(wēn)性,使反(fǎn)應中模板(bǎn)與(yǔ)引物的(dí)結(jié)合(復性)可(kě)以在較高(gāo)的(dí)溫度(dù)下(xià)進(jìn)行(háng),結(jié)合(hé)的(dí)特異(yì)性大(dà)大増(zēng)加加(jiā),被擴(kuò)増(zēng)的靶基因片段(duàn)也(yě)就能(néng)保持(chí)很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確度。再通過(guò)選擇特(tè)異性和(hé)保守性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基因區,其特異性程度就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
靈(líng)敏度高
PCR產物(wù)的生成量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方式増(zēng)加的,能將皮克(pg=10-129)量(liáng)級(jí)的(dí)起始待測模板擴増到微克(kè)(ug=10-69)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬個細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞;在病毒的檢測中(zhōng),PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空斑形成(chéng)單位);在細菌(jūn)學中zu小檢(jiǎn)出率(shuài)為3個(gè)細菌。
(3)簡便
，快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的(dí) Tag DNA聚(jù)合酶,一次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應液加好(hǎo)後(hòu),即在(zài)DNA擴増液和水浴鍋上進行(háng)變性(xìng)退火-延(yán)伸反應,一(yī)般在(zài)2-4小(xiǎo)時完成擴増反(fǎn)應(yīng)。擴増產物一般用電泳(yǒng)分析,不(bù)一定要用同位素,無(wú)放(fàng)射(shè)性(xìng)汙染
，易(yì)推廣(guǎng)。
(4)對標(biāo)本的(dí)純度(dù)要求低

不(bù)需要分離(lí)病毒(dú)或(huò)細菌及培養細胞,DNA粗製(zhì)品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可作(zuò)為擴増(zēng)模(mó)板。可(kě)直接(jiē)用臨床(chuáng)標本如血液
，體(tǐ)腔液(yè)
，洗嗽液(yè)
，毛發
，細胞(bāo)
，活PCR技術(shù)概論。

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