大(dà)鼠繆(móu)勒(lè)管抑(yì)製物質(zhì)/抗(kàng)繆勒管激(jī)素 ELISA試劑(jì)盒的(dí)間接(jiē)法(fǎ):
1.用(yòng)包被(bèi)緩衝液將(jiāng)已知(zhī)抗原稀釋(shì)至(zhì)1～10μg／ml，每(měi)孔加0.1ml，4℃過夜。
 
2.次日洗(xǐ)滌3次(cì)。
 
3.加一(yī)定(dìng)稀釋的待(dài)檢樣品(pǐn)(未知(zhī)抗體)0.1ml於(yú)上述已包被(bèi)之反(fǎn)應孔中,置37℃孵育1小(xiǎo)時(shí),洗(xǐ)滌。(同(tóng)時(shí)做(zuò)空白(bái)，陰性及陽性孔(kǒng)對照)於(yú)反應孔中(zhōng)，加(jiā)入新鮮(xiān)稀釋的酶(méi)標第(dì)二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵(fū)育(yù)30-60分鐘(zhōng)，洗滌(dí),最後(hòu)一遍用(yòng)DDW洗滌(dí)。
 
4. 加底(dǐ)物(wù)液(yè)顯色：於各(gè)反應(yīng)孔中(zhōng)加(jiā)入(rù)臨時(shí)配製的(dí)TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分(fēn)鐘(zhōng)。
 
5. 終止反應(yīng)：於各反應(yīng)孔中加(jiā)入2M硫酸0.05ml。
 
6. 結果判(pàn)定：可(kě)於白(bái)色背景上(shàng)，直(zhí)接(jiē)用(yòng)肉(ròu)眼(yǎn)觀察結果：反(fǎn)應(yīng)孔內顏(yán)色(sè)越(yuè)深，陽性程(chéng)度(dù)越(yuè)強，陰性(xìng)反應(yīng)為無色(sè)或極淺(qiǎn)，依據(jù)所(suǒ)呈顏色的深淺(qiǎn)，以“+”，“-”號表示(shì)。也可測(cè)O·D值(zhí)：在ELISA檢測儀(yí)上，於450nm(若(ruò)以ABTS顯色，則(zé)410nm)處，以空(kōng)白對照孔調零後(hòu)測各孔O·D值，若大於(yú)規(guī)定的陰性(xìng)對(duì)照(zhào)OD值的(dí)2.1倍(bèi)，即為(wéi)陽(yáng)性(xìng)。
試劑使用(yòng)須知(zhī)：
（1）請參(cān)照相(xiāng)關法規，文獻(xiàn)，MSDS等信息(xī)，理(lǐ)解(jiě)並(bìng)掌握好試劑(jì)的(dí)特(tè)性，再進(jìn)行安(ān)全(quán)操(cāo)作(zuò)。
（2）通常購買試劑時一(yī)定要(yào)想到一(yī)次性(xìng)用(yòng)完(wán)。若估(gū)算不(bù)足有剩餘(yú)的(dí)話(huà)，更加注意其他(tā)保管(guǎn)和管(guǎn)理(lǐ)。
（3）萬一試劑(jì)操(cāo)作者(zhě)並非(fēi)專業技(jì)術人員。必須在(zài)專(zhuān)業人(rén)士(shì)的指導(dǎo)監督(dū)下進行(háng)操作。對(duì)於(yú)使(shǐ)用(yòng)後(hòu)的(dí)廢棄物(wù)，不(bù)要(yào)或(huò)者舊的試劑，應按(àn)照(zhào)相關法(fǎ)律法規(guī)正當(dāng)處理。
（4）購買後，請務必(bì)確(què)認標(biāo)簽上(shàng)的(dí)注意(yì)事項(xiàng)；做好(hǎo)預(yù)防顛(diān)倒，摔壞(huài)的(dí)措施(shī)和(hé)管理體製(zhì)；在使用前再(zài)次(cì)確(què)認(rèn)標簽上的注意事項，做好必要(yào)的安全對(duì)策(cè)；對(duì)沒(méi)有(yǒu)標(biāo)明其(qí)危(wēi)害特性，有(yǒu)害(hài)特性(xìng)的(dí)，也要慎(shèn)重地(dì)進(jìn)行操(cāo)作；必(bì)須(xū)帶好防(fáng)護用具，小心(xīn)翼翼(yì)進(jìn)行操(cāo)作(zuò)。