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人乳清蛋(dàn)白(hLALBA)轉(zhuǎn)基(jī)因成分(fēn)核酸(suān)檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒應用(yòng)案(àn)例
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2021-10-13 瀏覽次數:850
人(rén)乳清(qīng)蛋(dàn)白(bái)(hLALBA)轉(zhuǎn)基(jī)因成(chéng)分核酸檢測試劑盒應用案例(lì):
樣品 DNA 的製(zhì)備(bèi)
1.用自(zì)選(xuǎn)方法(fǎ)純化樣(yàng)品的(dí) DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒(dú) DNA 提取試(shì)劑(jì)盒兼 容(róng)。。也可以(yǐ)選購本公司的一管(guǎn)式病毒 DNAout 或其(qí)升(shēng)級版(bǎn)柱(zhù)式(shì)病(bìng)毒 DNAout。 本(běn)試劑盒免(miǎn)費(fèi)贈送(sòng) 15 次 DNA 病毒(dú)裂解液(yè)試用(yòng)裝(一(yī)管式(shì)病毒 DNAout 的成分(fēn))。
稀釋陽性對照(zhào)(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍(bèi)稀釋(shì)度為例(lì)。由(yóu)於(yú)標(biāo)準品(pǐn)濃度非常(cháng)高,因(yīn)此下列稀釋操作(zuò)一定要在(zài)獨立的區域進(jìn)行,千萬(wàn)不能汙染樣(yàng)品或本試(shì)劑盒(hé)的其(qí)他(tā)成(chéng)分)。為增(zēng)加產(chǎn)品(pǐn)穩定(dìng)性和(hé)避免擴(kuò)散傳(chuán)染性病(bìng)原,本產(chǎn)品不(bù)提供(gōng)活體(tǐ)樣(yàng)品做陽性(xìng)對照,隻(zhī)提供可(kě)以直接使(shǐ)用的(dí)長(cháng)為 86bp 的 DNA 片段作為(wéi)陽(yáng)性對(duì)照(zhào)。
2.標記 6 個離(lí)心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍(qiāng)頭(tóu)分別加入 45 μL 模(mó)板稀(xī)釋(shì)液(用(yòng)帶(dài)芯槍(qiāng)頭(tóu),下同)。
4.在(zài) 7 號(hào)管中加(jiā)入 5 μL 1×10E8 拷(kǎo)貝(bèi)/μL 的(dí)陽性對(duì)照,充(chōng)分(fēn)震(zhèn)蕩(dàng) 1 分鐘(zhōng),得1×10E7 拷(kǎo)貝(bèi)/μL 的(dí)陽性對照。放冰上(shàng)待用(yòng)。5.換槍(qiāng)頭,在(zài) 6 號管中加入(rù) 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(zhào)(上(shàng)步(bù)稀(xī)釋(shì)所得),充(chōng)分(fēn)震(zhèn)蕩 1 分鐘,得(dé) 1×10E6 拷(kǎo)貝/μL 的陽(yáng)性(xìng)對(duì)照(zhào)。放冰上待(dài)用。
6.換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的(dí)陽性(xìng)對照(zhào)到 5 號管中(zhōng),充分震(zhèn)蕩 1 分鐘,得(dé) 1×10E5 拷貝(bèi)/μL 的(dí)陽性對照。放冰上(shàng)待用(yòng)。
7.換槍頭,在 4 號管(guǎn)中加(jiā) 5 μL 1×10E5 拷(kǎo)貝/μL 的(dí)陽性(xìng)對照到(dào) 4 號管(guǎn)中,得1×10E4 拷貝(bèi)/μL 的陽性(xìng)對照。放冰上待(dài)用(yòng)。
8.重復(fù)上麵的操作直(zhí)到得(dé)到 6 個稀釋(shì)度(dù)的陽性(xìng)對(duì)照(zhào)。放冰(bīng)上待用(yòng)。設置(zhì) qPCR 反應(20 μL 體(tǐ)係(xì),在(zài)樣品製(zhì)備室進(jìn)行)
9.在 PCR 管(guǎn)中加入下列成分。
樣品 DNA 的製(zhì)備(bèi)
1.用自(zì)選(xuǎn)方法(fǎ)純化樣(yàng)品的(dí) DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒(dú) DNA 提取試(shì)劑(jì)盒兼 容(róng)。。也可以(yǐ)選購本公司的一管(guǎn)式病毒 DNAout 或其(qí)升(shēng)級版(bǎn)柱(zhù)式(shì)病(bìng)毒 DNAout。 本(běn)試劑盒免(miǎn)費(fèi)贈送(sòng) 15 次 DNA 病毒(dú)裂解液(yè)試用(yòng)裝(一(yī)管式(shì)病毒 DNAout 的成分(fēn))。
稀釋陽性對照(zhào)(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍(bèi)稀釋(shì)度為例(lì)。由(yóu)於(yú)標(biāo)準品(pǐn)濃度非常(cháng)高,因(yīn)此下列稀釋操作(zuò)一定要在(zài)獨立的區域進(jìn)行,千萬(wàn)不能汙染樣(yàng)品或本試(shì)劑盒(hé)的其(qí)他(tā)成(chéng)分)。為增(zēng)加產(chǎn)品(pǐn)穩定(dìng)性和(hé)避免擴(kuò)散傳(chuán)染性病(bìng)原,本產(chǎn)品不(bù)提供(gōng)活體(tǐ)樣(yàng)品做陽性(xìng)對照,隻(zhī)提供可(kě)以直接使(shǐ)用的(dí)長(cháng)為 86bp 的 DNA 片段作為(wéi)陽(yáng)性對(duì)照(zhào)。
2.標記 6 個離(lí)心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍(qiāng)頭(tóu)分別加入 45 μL 模(mó)板稀(xī)釋(shì)液(用(yòng)帶(dài)芯槍(qiāng)頭(tóu),下同)。
4.在(zài) 7 號(hào)管中加(jiā)入 5 μL 1×10E8 拷(kǎo)貝(bèi)/μL 的(dí)陽性對(duì)照,充(chōng)分(fēn)震(zhèn)蕩(dàng) 1 分鐘(zhōng),得1×10E7 拷(kǎo)貝(bèi)/μL 的(dí)陽性對照。放冰上(shàng)待用(yòng)。5.換槍(qiāng)頭,在(zài) 6 號管中加入(rù) 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(zhào)(上(shàng)步(bù)稀(xī)釋(shì)所得),充(chōng)分(fēn)震(zhèn)蕩 1 分鐘,得(dé) 1×10E6 拷(kǎo)貝/μL 的陽(yáng)性(xìng)對(duì)照(zhào)。放冰上待(dài)用。
6.換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的(dí)陽性(xìng)對照(zhào)到 5 號管中(zhōng),充分震(zhèn)蕩 1 分鐘,得(dé) 1×10E5 拷貝(bèi)/μL 的(dí)陽性對照。放冰上(shàng)待用(yòng)。
7.換槍頭,在 4 號管(guǎn)中加(jiā) 5 μL 1×10E5 拷(kǎo)貝/μL 的(dí)陽性(xìng)對照到(dào) 4 號管(guǎn)中,得1×10E4 拷貝(bèi)/μL 的陽性(xìng)對照。放冰上待(dài)用(yòng)。
8.重復(fù)上麵的操作直(zhí)到得(dé)到 6 個稀釋(shì)度(dù)的陽性(xìng)對(duì)照(zhào)。放冰(bīng)上待用(yòng)。設置(zhì) qPCR 反應(20 μL 體(tǐ)係(xì),在(zài)樣品製(zhì)備室進(jìn)行)
9.在 PCR 管(guǎn)中加入下列成分。
