產品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名稱(chēng) | 英(yīng)文名稱 | 貨號(hào) |
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馬(mǎ)梭菌PCR檢測試(shì)劑盒 |
Clostridium equiPCR |
YS-P014029 |
分類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)
儲存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避(bì)免反復凍融。
運輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效期(qī)：一年(nián)
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有效(xiào)期(qī)一(yī)般(bān)為1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫度下(xià)。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分的(dí)試(shì)劑(jì)一(yī)般(bān)要(yào)貯存於-20℃下，產物檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果分析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫(xiàn)設定(dìng)在剛(gāng)好超(chāo)過正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質控(kòng)品擴(kuò)增曲綫的(dí)最高(gāo)點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性質控品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果應為陽性(xìng)，有明顯(xiǎn)的指數擴增期，Ct值應小於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需在(zài)一(yī)次實驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿足，否則該(gāi)次(cì)實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無效(xiào)。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為可(kě)疑樣(yàng)本；對(duì)於可(kě)疑樣(yàng)本建議復(fù)核一(yī)次(cì)，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指數擴(kuò)增期，則判定為(wéi)陽性(xìng)，否則判(pàn)定(dìng)為陰性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果的(dí)解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙染(rǎn)，試(shì)劑汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸，保存(cún)不當或(huò)試劑配製(zhì)不準確引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑檢測效能(néng)下(xià)降(jiàng)，可能(néng)會(huì)導致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的特(tè)異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應的忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的(dí)特(tè)異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
馬(mǎ)梭菌PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)其中(zhōng)引(yǐn)物與模(mó)板的(dí)正(zhèng)確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與(yǔ)模板的(dí)結合(hé)及引(yǐn)物鏈的(dí)延伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對原則的(dí)。聚合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的忠實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐(nài)高溫性(xìng)，使反(fǎn)應中(zhōng)模板與引物的(dí)結合(復性)可以在較(jiào)高的溫(wēn)度下進行(háng)，結(jié)合的(dí)特(tè)異(yì)性大(dà)大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴增(zēng)的靶(bǎ)基因片(piàn)段也就能(néng)保持很高的正確(què)度(dù)。再通過選(xuǎn)擇(zé)特異性(xìng)和保守(shǒu)性高的靶基因區(qū)，其特異(yì)性程度(dù)就更高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生成量是以指(zhǐ)數方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模板擴增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢出(chū)一個靶(bǎ)細(xì)胞；在病毒的(dí)檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈敏度可(kě)達(dá)3個RFU(空斑(bān)形成單位)；在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反應用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶，一次(cì)性地將(jiāng)反應(yīng)液加好後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增產物一般用電泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一(yī)定(dìng)要用(yòng)同位素(sù)，無(wú)放射(shè)性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的(dí)純(chún)度要(yào)求(qiú)低(dī)
不需要(yào)分離病毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及(jí)培養細胞，DNA 粗(cū)製品及總RNA均(jūn)可作(zuò)為擴增模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接用臨(lín)床標(biāo)本如(rú)血液(yè)，體腔液，洗嗽液，毛(máo)發，細(xì)胞，活(huó)PCR技術(shù)概(gài)論。
