產(chǎn)品中心
PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱 | 規格(gé) | 貨(huò)號 |
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卡氏肺(fèi)孢子蟲PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé) |
50T |
YS-P015085 |
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避光保存，避(bì)免反復(fù)凍融(róng)。
運輸：低溫，避光(guāng)。
有效期(qī)：一年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試(shì)劑盒的有效期一(yī)般(bān)為1年(nián)，這是指在適(shì)當的儲(chǔ)存(cún)溫度下。核酸擴(kuò)增(zēng)部分的試劑一般要貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產物檢測部分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免反復凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析(xī)條件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在剛好(hǎo)超(chāo)過正常(cháng)陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增曲綫的最高點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品的檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性，有(yǒu)明顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等於35；
3. 以上要求(qiú)需在(zài)一(yī)次實驗中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則該次(cì)實(shí)驗(yàn)視為無效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑：有明顯的(dí)指數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本(běn)為(wéi)可疑樣本；對(duì)於(yú)可疑樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復核(hé)一次，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增期，則判定為陽(yáng)性，否則判定為陰性；
3. 陰性：無(wú)指數擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定(dìng)為陰性樣(yàng)本。
【對檢驗(yàn)結果的解釋】
1. 實驗室環境汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染，樣品(pǐn)交叉汙(wū)染(rǎn)會出(chū)現假陽性結(jié)果；
2. 試劑運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不(bù)當(dāng)或試劑(jì)配(pèi)製不準確引起的試(shì)劑(jì)檢測(cè)效(xiào)能下降，可能會導致(zhì)出現假(jiǎ)陰性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特(tè)異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特(tè)異性(xìng)與保守(shǒu)性。
卡氏肺孢子蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)其中引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板的正確(què)結(jié)合是關(guān)鍵。引物與(yǔ)模板(bǎn)的結合及(jí)引物鏈(liàn)的延伸是遵循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高溫性，使(shǐ)反應中模(mó)板與(yǔ)引物(wù)的結(jié)合(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的溫度(dù)下(xià)進行，結合(hé)的(dí)特異(yì)性大大(dà)增加，被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段也(yě)就能保持(chí)很高的正確度。再通過選擇特異性(xìng)和(hé)保守性(xìng)高的(dí)靶基因區，其特(tè)異性程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產物(wù)的生(shēng)成量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數方式(shì)增(zēng)加(jiā)的(dí)，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始待測(cè)模板(bǎn)擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢出(chū)一個(gè)靶細胞(bāo)；在病毒的檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈敏度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單位(wèi))；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出(chū)率為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一(yī)次(cì)性地(dì)將反應液(yè)加好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進行(háng)變(biàn)性(xìng)-退火-延伸反(fǎn)應，一(yī)般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴(kuò)增反應。擴增產物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析，不一(yī)定要(yào)用(yòng)同(tóng)位素，無放射性汙(wū)染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純(chún)度要求低
不(bù)需要分(fēn)離(lí)病(bìng)毒或細菌(jūn)及培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總RNA均可(kě)作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接用(yòng)臨床標本(běn)如(rú)血液，體腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發，細胞，活PCR技術概論。
