產品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬性
| 產品名稱 | 英文(wén)名稱 | 貨(huò)號(hào) |
|
人(rén)膚蠅PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒 |
Dermatobia hominisPCR |
YS-P014092 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存，避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效期(qī)：一(yī)年(nián)
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒(hé)的有效期一般(bān)為1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在適當的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴增(zēng)部分的(dí)試劑一般(bān)要(yào)貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑(jì)則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反復凍融。
【結(jié)果分析(xī)條件設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值綫(xiàn)設定在(zài)剛好超過正常陰(yīn)性質控品擴增曲綫的最(zuì)高(gāo)點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性質控品的(dí)檢測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽性(xìng)，有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct值應小於等(děng)於(yú)35；
3. 以上要求(qiú)需在(zài)一次實驗中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足，否則(zé)該(gāi)次(cì)實(shí)驗(yàn)視(shì)為無(wú)效。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣本(běn)；對(duì)於可疑樣(yàng)本建(jiàn)議復核(hé)一(yī)次，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴增(zēng)期，則(zé)判定(dìng)為陽性(xìng)，否則判(pàn)定(dìng)為陰性；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果的(dí)解釋】
1. 實驗室(shì)環(huán)境汙染(rǎn)，試劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣品交叉(chā)汙染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假陽性結(jié)果；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存(cún)不(bù)當或試(shì)劑配(pèi)製不準(zhǔn)確引(yǐn)起的試劑檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下降，可能(néng)會導(dǎo)致出現假陰性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的特異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶基因的(dí)特異性與保守(shǒu)性。
人膚蠅(yíng)PCR檢測試(shì)劑盒其中引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的正確(què)結合是關鍵。引物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的結(jié)合(hé)及引(yǐn)物鏈的(dí)延伸(shēn)是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配對(duì)原(yuán)則的(dí)。聚合酶(méi)合成反(fǎn)應的忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高溫性(xìng)，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板與引物的(dí)結(jié)合(hé)(復性(xìng))可以(yǐ)在較(jiào)高的溫度(dù)下進行，結合(hé)的特(tè)異(yì)性大大(dà)增加(jiā)，被擴增的靶基(jī)因片(piàn)段也(yě)就能(néng)保持(chí)很(hěn)高的(dí)正確度(dù)。再通過(guò)選擇(zé)特異(yì)性和保守性(xìng)高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因區，其(qí)特(tè)異性(xìng)程(chéng)度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的生成(chéng)量(liáng)是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方式(shì)增加的(dí)，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢出(chū)一個靶細胞；在病毒(dú)的(dí)檢測(cè)中，PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可達(dá)3個RFU(空斑形(xíng)成單位)；在細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一次性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液(yè)加好(hǎo)後，即在(zài)DNA擴增液和水浴鍋(guō)上(shàng)進行變(biàn)性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增反(fǎn)應。擴增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析，不一定要(yào)用同位(wèi)素，無(wú)放射性汙染，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純度(dù)要(yào)求低(dī)
不(bù)需(xū)要分離病(bìng)毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品及(jí)總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模板。可直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床標(biāo)本如(rú)血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽液，毛發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術(shù)概論。
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