產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英文名稱 | 貨(huò)號 |
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遲(chí)鈍愛德華菌PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Edwardsiella tardaPCR |
YS-P014116 |
分類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存，避(bì)免反復(fù)凍融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年
貨(huò)期(qī)：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般(bān)為1年(nián)，這是指在適(shì)當的(dí)儲存溫度下。核酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的試劑一般(bān)要貯存(cún)於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測部(bù)分(fēn)試(shì)劑則貯存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍(dòng)融(róng)。
【結果分析條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值綫設定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰(yīn)性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增曲綫的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢測結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽性(xìng)，有明顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需(xū)在(zài)一次實驗中同(tóng)時滿足(zú)，否則(zé)該(gāi)次實(shí)驗視為無效。
【結果判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑樣本；對(duì)於可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復核(hé)一次，若復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增期，則判定(dìng)為(wéi)陽性(xìng)，否則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰性；
3. 陰性：無指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均判定為(wéi)陰性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙(wū)染，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染(rǎn)會出(chū)現假(jiǎ)陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不當或(huò)試劑配(pèi)製不準確引(yǐn)起的試(shì)劑檢測效(xiào)能下(xià)降，可能會導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性結果。
PCR反應(yīng)的特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的忠(zhōng)實性；
④靶基因的特(tè)異性與保守(shǒu)性(xìng)。
遲鈍愛(ài)德(dé)華菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)其(qí)中引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確(què)結合是(shì)關(guān)鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模板的(dí)結合及引(yǐn)物(wù)鏈的延伸是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基(jī)配對原則(zé)的。聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚(jù)合酶耐高(gāo)溫性，使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與引物(wù)的結合(hé)(復(fù)性)可(kě)以在(zài)較(jiào)高的溫度(dù)下進行(háng)，結合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性大大(dà)增加(jiā)，被擴增的靶基(jī)因片(piàn)段也就(jiù)能(néng)保持很高(gāo)的正確度(dù)。再通過選擇特(tè)異(yì)性和保守性高的(dí)靶基因(yīn)區，其(qí)特異性(xìng)程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量是以指(zhǐ)數方式增加的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待(dài)測模板(bǎn)擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬個細(xì)胞中(zhōng)檢出(chū)一個靶細胞(bāo)；在(zài)病毒的檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單位(wèi))；在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一(yī)次(cì)性地將(jiāng)反應(yīng)液(yè)加(jiā)好後(hòu)，即(jí)在DNA擴(kuò)增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變性-退火(huǒ)-延(yán)伸反應，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴增反(fǎn)應。擴增產(chǎn)物一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析(xī)，不(bù)一定要用(yòng)同位素，無放射性汙(wū)染，易(yì)推廣。
(4) 對標本的純(chún)度(dù)要求低(dī)
不需(xū)要分離病(bìng)毒或細(xì)菌及培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增模(mó)板(bǎn)。可直接用臨床標本如血(xiě)液，體腔液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術(shù)概(gài)論。
