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產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
商(shāng)品屬性
| 產(chǎn)品名稱 | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨號(hào) |
|
腸賈第(dì)蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒 |
Giardia intestinalisPCR |
YS-P014232 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)
儲存條(tiáo)件：-20℃避光(guāng)保存，避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸：低(dī)溫(wēn)，避光(guāng)。
有效期：一年
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一般(bān)為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指在(zài)適(shì)當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫度下(xià)。核酸擴增部分的試劑(jì)一般要貯存於(yú)-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反復凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超過(guò)正常(cháng)陰性質控品(pǐn)擴增曲綫的最高點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性，有明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小於等於(yú)35；
3. 以上要求需在一次(cì)實驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足(zú)，否則(zé)該(gāi)次(cì)實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
【結(jié)果判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為(wéi)可疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對於可疑(yí)樣本建議復核一(yī)次，若復(fù)核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴(kuò)增期，則(zé)判定(dìng)為陽(yáng)性，否則(zé)判(pàn)定為陰(yīn)性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解釋】
1. 實驗(yàn)室環境汙染，試劑(jì)汙染，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉汙染(rǎn)會(huì)出現(xiàn)假陽性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運輸，保(bǎo)存(cún)不(bù)當或試劑(jì)配(pèi)製(zhì)不(bù)準確引起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能下降，可(kě)能(néng)會(huì)導致出現假陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應的特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反應的(dí)忠實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特(tè)異性與保(bǎo)守(shǒu)性。
腸賈第蟲PCR檢測(cè)試劑盒其(qí)中引物與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確結(jié)合(hé)是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模(mó)板的結合及(jí)引(yǐn)物鏈的延伸是遵循(xún)鹼基配(pèi)對原則的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應中模(mó)板(bǎn)與引物的(dí)結(jié)合(hé)(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在較(jiào)高的溫度下(xià)進行，結合的特(tè)異性(xìng)大大(dà)增加，被擴增的靶(bǎ)基(jī)因片段(duàn)也就能(néng)保持很高(gāo)的(dí)正(zhèng)確度。再通(tōng)過選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性高(gāo)的靶基因區，其特(tè)異性(xìng)程度(dù)就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生(shēng)成(chéng)量是以指(zhǐ)數(shù)方式增加(jiā)的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始待測(cè)模(mó)板擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個(gè)細胞(bāo)中檢出一(yī)個靶細胞；在(zài)病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測(cè)中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成單位)；在細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反應(yīng)用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應液加好後，即(jí)在DNA擴增液和水浴鍋上進(jìn)行(háng)變性-退(tuì)火-延伸反應，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時完成擴(kuò)增反應。擴增(zēng)產物一般(bān)用電(diàn)泳(yǒng)分析(xī)，不一定要用同(tóng)位素(sù)，無(wú)放射性汙染，易推廣。
(4) 對標本的(dí)純度(dù)要(yào)求低(dī)
不需(xū)要分離(lí)病毒(dú)或細菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製品及總RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板。可直(zhí)接(jiē)用臨床標本(běn)如血液，體(tǐ)腔液，洗嗽液，毛(máo)發(fā)，細胞，活(huó)PCR技(jì)術概論。
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