產品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬性
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨(huò)號(hào) |
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詹姆(mǔ)士(shì)城峽(xiá)穀病毒PCR檢測試劑盒(hé) |
Jamestown Canyon Virus (JCV）RTPCR |
YS-P014344 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
儲存條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸：低溫，避光(guāng)。
有效(xiào)期：一年
貨(huò)期：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效期一(yī)般為1年，這是指(zhǐ)在適當的(dí)儲存溫度(dù)下。核(hé)酸擴(kuò)增部分(fēn)的試劑一般要(yào)貯存於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測(cè)部分試劑(jì)則(zé)貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免反復凍融。
【結果分析條件設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值綫設定(dìng)在(zài)剛好超(chāo)過正(zhèng)常陰(yīn)性質控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫的最(zuì)高點。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有明顯的(dí)指數擴增期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需(xū)在一(yī)次(cì)實(shí)驗中同(tóng)時滿(mǎn)足，否(fǒu)則該次(cì)實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效。
【結果判斷】
2.可疑：有(yǒu)明顯的指數(shù)擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為可(kě)疑樣(yàng)本(běn)；對於(yú)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議復核一(yī)次，若復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則(zé)判定為陽(yáng)性，否則(zé)判定為陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定(dìng)為陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環境汙染，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙染(rǎn)會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存不當(dāng)或試劑(jì)配製不準確引(yǐn)起的試劑檢測(cè)效能(néng)下降(jiàng)，可能會(huì)導(dǎo)致出現假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異性：
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性；
④靶(bǎ)基因的特(tè)異性(xìng)與保(bǎo)守(shǒu)性。
詹姆士城(chéng)峽穀病毒PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其中(zhōng)引物與模(mó)板的(dí)正(zhèng)確(què)結(jié)合是關鍵。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的結合(hé)及引(yǐn)物鏈(liàn)的延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循鹼基(jī)配(pèi)對原則(zé)的(dí)。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反應的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高(gāo)溫性，使(shǐ)反應中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引物(wù)的(dí)結(jié)合(復性(xìng))可以(yǐ)在較(jiào)高的溫度(dù)下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大(dà)增(zēng)加，被擴增的(dí)靶基因片段也(yě)就能保持很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通過選擇(zé)特異(yì)性和保守(shǒu)性高的(dí)靶基因區，其特(tè)異性程(chéng)度就更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的(dí)生成量是(shì)以(yǐ)指數方式增加的，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始(shǐ)待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細胞(bāo)中檢出一個(gè)靶細胞(bāo)；在(zài)病毒的檢測(cè)中，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位)；在(zài)細菌學中zui小檢出(chū)率為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一次性地將反應液加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴(kuò)增液和(hé)水浴鍋(guō)上進(jìn)行變(biàn)性-退火-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng)，一般(bān)在2～4 小時(shí)完(wán)成(chéng)擴(kuò)增反(fǎn)應(yīng)。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一(yī)般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析，不(bù)一定要用(yòng)同位素，無放射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度(dù)要求(qiú)低
不(bù)需(xū)要分離病(bìng)毒或細(xì)菌及(jí)培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均(jūn)可作為擴增(zēng)模(mó)板。可直接用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如血液(yè)，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛發，細胞，活PCR技(jì)術概論。
