產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號(hào) |
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結核(hé)分枝杆菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Mycobacterium tuberculosis(MTB)PCR |
YS-P014467 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試劑盒(hé)
儲存條件：-20℃避光保存(cún)，避免反復(fù)凍(dòng)融。
運輸：低(dī)溫，避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期：一年(nián)
貨(huò)期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒(hé)的(dí)有效(xiào)期一(yī)般為(wéi)1年，這是指(zhǐ)在(zài)適當的儲存溫度下。核酸(suān)擴(kuò)增部分的試(shì)劑(jì)一(yī)般要貯存於(yú)-20℃下(xià)，產物檢測部(bù)分試劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融。
【結果分析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛好(hǎo)超過(guò)正常陰性質控(kòng)品(pǐn)擴增曲(qū)綫的(dí)最高點。
【質控標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品的檢(jiǎn)測結(jié)果應(yīng)為陽(yáng)性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小於(yú)等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要求需(xū)在(zài)一次實驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次(cì)實(shí)驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
【結果判斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可(kě)疑樣(yàng)本(běn)；對(duì)於(yú)可疑樣本建(jiàn)議(yì)復核一次(cì)，若復核結(jié)果Ct<40且有指數擴增期(qī)，則(zé)判(pàn)定為陽性(xìng)，否則(zé)判定為(wéi)陰性；
3. 陰性：無(wú)指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙(wū)染，試(shì)劑(jì)汙染，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染會(huì)出現(xiàn)假陽性結果；
2. 試劑(jì)運輸，保存不(bù)當(dāng)或(huò)試劑(jì)配製不準(zhǔn)確(què)引起(qǐ)的試劑(jì)檢測效能(néng)下(xià)降，可能會(huì)導(dǎo)致出現假(jiǎ)陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠實性；
④靶基因的特(tè)異(yì)性與(yǔ)保守性。
結(jié)核(hé)分枝(zhī)杆菌PCR檢測試劑盒其(qí)中(zhōng)引物與模(mó)板的正確(què)結(jié)合是關(guān)鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模板的結合(hé)及(jí)引物(wù)鏈(liàn)的延伸是遵(zūn)循(xún)鹼基配(pèi)對原(yuán)則的。聚(jù)合(hé)酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫性(xìng)，使反(fǎn)應中模板(bǎn)與引(yǐn)物的結合(復性)可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高(gāo)的(dí)溫(wēn)度(dù)下進行，結(jié)合的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大大(dà)增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增的靶基因片段也(yě)就能(néng)保持很高的正確度。再通過選擇特(tè)異(yì)性和保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基因(yīn)區(qū)，其(qí)特異性程度就(jiù)更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增(zēng)加(jiā)的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始待(dài)測模板擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬個細胞(bāo)中檢出(chū)一個靶細(xì)胞；在病毒(dú)的檢測中，PCR的(dí)靈敏度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形(xíng)成(chéng)單位)；在(zài)細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢出(chū)率(shuài)為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次(cì)性地(dì)將反(fǎn)應液(yè)加好(hǎo)後，即在DNA擴增(zēng)液和水浴鍋上進行(háng)變(biàn)性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸反應，一般在(zài)2～4 小時完成(chéng)擴(kuò)增反(fǎn)應。擴(kuò)增(zēng)產物一(yī)般(bān)用電泳分析(xī)，不(bù)一(yī)定要(yào)用(yòng)同(tóng)位素，無放(fàng)射性(xìng)汙染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的純度要(yào)求(qiú)低(dī)
不需要分離(lí)病毒(dú)或細菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均可(kě)作為(wéi)擴增(zēng)模板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標本如血液，體腔液，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發，細胞，活PCR技(jì)術概論(lùn)。
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