產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試劑盒
商品(pǐn)屬性
| 產(chǎn)品名稱 | 英(yīng)文(wén)名稱 | 貨號 |
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絲(sī)狀支原(yuán)體(tǐ)絲狀(zhuàng)亞種型(xíng)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Mycoplasma mycoides subsp(mycoides SC)SCPCR |
YS-P014487 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲存條件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存，避免反復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸：低溫，避光。
有效期：一年
貨期(qī)：現貨PCR試(shì)劑盒的(dí)有(yǒu)效期一般為(wéi)1年，這是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的儲存(cún)溫度下(xià)。核酸擴增(zēng)部分的(dí)試劑一般(bān)要(yào)貯存於-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分試劑則(zé)貯存於2-8℃。盡量避(bì)免反復(fù)凍融。
【結(jié)果分析條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定在剛好(hǎo)超過正常陰性質控品擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的最高點。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品的檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增(zēng)期，Ct值應小於(yú)等於35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需(xū)在(zài)一(yī)次實驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時滿足(zú)，否(fǒu)則該(gāi)次(cì)實驗(yàn)視(shì)為無效。
【結(jié)果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為可疑(yí)樣本；對(duì)於可疑樣(yàng)本建(jiàn)議復(fù)核一次(cì)，若復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數擴增期，則(zé)判定為(wéi)陽性，否則(zé)判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交叉汙染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存(cún)不當(dāng)或試(shì)劑配製不準確(què)引(yǐn)起的試(shì)劑(jì)檢測效能(néng)下降(jiàng)，可(kě)能會導(dǎo)致(zhì)出現假陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異(yì)性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性；
④靶基因的特異(yì)性與保(bǎo)守性(xìng)。
絲狀(zhuàng)支(zhī)原體(tǐ)絲(sī)狀亞(yà)種型(xíng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒其中(zhōng)引物(wù)與模板的正(zhèng)確結合(hé)是關鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的結(jié)合及引(yǐn)物鏈的延伸是(shì)遵循鹼基(jī)配對(duì)原則的。聚合酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫性，使(shǐ)反應(yīng)中模板與引(yǐn)物的結(jié)合(hé)(復性)可(kě)以在較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度下進行，結(jié)合的特異性大大(dà)增(zēng)加，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能保持(chí)很(hěn)高(gāo)的正確度(dù)。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇特(tè)異性和保守性高的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區(qū)，其(qí)特(tè)異性程(chéng)度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物的生成(chéng)量是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始(shǐ)待(dài)測模板擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個(gè)靶細胞；在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成單(dān)位)；在(zài)細(xì)菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次(cì)性地將反應液加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴增液(yè)和(hé)水浴(yù)鍋上進(jìn)行變(biàn)性(xìng)-退火-延(yán)伸反應，一(yī)般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳分析(xī)，不(bù)一定(dìng)要用同(tóng)位素，無放射性汙染，易推廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純度(dù)要求低(dī)
不需要分(fēn)離病毒或(huò)細菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均(jūn)可作(zuò)為擴增(zēng)模板。可(kě)直(zhí)接用臨床標本(běn)如(rú)血液，體(tǐ)腔液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發，細(xì)胞，活PCR技術概論。
