產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨號(hào) |
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耐(nài)青(qīng)黴素肺(fèi)炎(yán)鏈球菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒 |
Penicillinresistant Streptococcus pneumoniae(PRSP)PCR |
YS-P014570 |
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
儲存條件：-20℃避光保(bǎo)存，避免反(fǎn)復凍融。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避光。
有效(xiào)期：一年
貨期：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有效期(qī)一(yī)般(bān)為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指在(zài)適(shì)當(dāng)的儲存(cún)溫(wēn)度下。核酸擴增部分的試劑一般要貯存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測部分試劑(jì)則(zé)貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量避免反復凍融。
【結(jié)果分(fēn)析條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫(xiàn)設定在剛好超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰性質(zhì)控品擴(kuò)增曲綫的最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢測結果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性，有(yǒu)明顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等(děng)於35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在一(yī)次實驗中(zhōng)同(tóng)時滿足，否(fǒu)則該次(cì)實(shí)驗(yàn)視(shì)為(wéi)無(wú)效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑：有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本；對(duì)於可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復核一次(cì)，若(ruò)復(fù)核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增(zēng)期，則判(pàn)定為(wéi)陽性，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無指數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值均判定為(wéi)陰性(xìng)樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙染(rǎn)，試(shì)劑汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉汙染會(huì)出現假陽(yáng)性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸(shū)，保存不當或試劑配(pèi)製不準(zhǔn)確引起(qǐ)的(dí)試(shì)劑檢測(cè)效能下(xià)降，可(kě)能(néng)會(huì)導致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特(tè)異性：
②鹼基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性；
④靶基因(yīn)的(dí)特(tè)異性(xìng)與(yǔ)保守性。
耐青(qīng)黴(méi)素(sù)肺炎鏈(liàn)球(qiú)菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引(yǐn)物與模板(bǎn)的正確結合是關鍵。引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的(dí)結(jié)合及(jí)引物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵(zūn)循鹼基配對原(yuán)則的。聚合酶(méi)合成反應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性，使反應中(zhōng)模板與引(yǐn)物的(dí)結(jié)合(復性)可(kě)以(yǐ)在較高的溫(wēn)度(dù)下進行，結(jié)合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性大大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴增(zēng)的(dí)靶基因(yīn)片段也(yě)就(jiù)能(néng)保持很高的正(zhèng)確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇特異(yì)性和(hé)保守性高的靶(bǎ)基因區(qū)，其(qí)特異性(xìng)程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生成量(liáng)是以指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加的(dí)，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模(mó)板擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶細(xì)胞；在(zài)病(bìng)毒的檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空斑(bān)形成(chéng)單(dān)位)；在(zài)細菌(jūn)學(xué)中zui小檢出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一次(cì)性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液加好後(hòu)，即在DNA擴增液(yè)和水浴(yù)鍋上進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火-延(yán)伸反應(yīng)，一(yī)般(bān)在2～4 小時(shí)完(wán)成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般(bān)用電泳分(fēn)析(xī)，不一定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素，無放(fàng)射性(xìng)汙染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低(dī)
不需(xū)要分(fēn)離病毒或(huò)細菌(jūn)及(jí)培養細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均可(kě)作(zuò)為擴增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可(kě)直接用臨(lín)床標本如血液，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發，細胞(bāo)，活PCR技術概論。
