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PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)
| 產品名稱(chēng) | 英文名(míng)稱 | 貨號 |
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純綠(lǜ)青黴PCR檢測(cè)試劑盒 |
Penicillium viridicatumPCR |
YS-P014581 |
分類:PCR檢(jiǎn)測試劑盒
儲存(cún)條件:-20℃避光保存,避免反(fǎn)復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低(dī)溫(wēn),避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī):一(yī)年(nián)
貨期:現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的有效(xiào)期(qī)一般為(wéi)1年,這(zhè)是指(zhǐ)在(zài)適當(dāng)的(dí)儲存溫(wēn)度下(xià)。核酸擴(kuò)增(zēng)部分的試(shì)劑一般(bān)要貯存(cún)於(yú)-20℃下,產(chǎn)物檢測部分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復(fù)凍融。
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定:將閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在剛好超過正(zhèng)常(cháng)陰性質控品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的最(zuì)高點(diǎn)。
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品(pǐn)的(dí)檢測(cè)結果應為(wéi)陽(yáng)性(xìng),有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期,Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等於35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需(xū)在(zài)一(yī)次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿足,否(fǒu)則該次實驗(yàn)視(shì)為無效。
2.可(kě)疑:有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī),且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣本為可疑樣(yàng)本(běn);對(duì)於可(kě)疑樣(yàng)本建議復核(hé)一次,若復核結果Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期,則判(pàn)定(dìng)為陽(yáng)性,否則判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng);
3. 陰性(xìng):無(wú)指(zhǐ)數擴增期,Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判定為陰性樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果的解釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙染(rǎn),試(shì)劑汙(wū)染,樣品交叉汙(wū)染(rǎn)會(huì)出現假(jiǎ)陽性結果;
2. 試劑(jì)運(yùn)輸,保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或(huò)試(shì)劑配製不準確(què)引起的試劑檢測(cè)效(xiào)能(néng)下降,可能會(huì)導致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反應的忠實(shí)性;
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特(tè)異(yì)性與(yǔ)保守性。
純綠青(qīng)黴PCR檢測(cè)試劑盒(hé)其中引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)正確(què)結合(hé)是(shì)關(guān)鍵。引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的(dí)結(jié)合及引物(wù)鏈(liàn)的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則(zé)的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫(wēn)性,使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(hé)(復性(xìng))可以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度下進(jìn)行,結合(hé)的特異性大大增加,被擴(kuò)增(zēng)的靶基因片段(duàn)也就能(néng)保持很高的(dí)正確度(dù)。再(zài)通過選(xuǎn)擇(zé)特異性(xìng)和保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因區(qū),其特(tè)異(yì)性程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量是以(yǐ)指數(shù)方(fāng)式(shì)增加的(dí),能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起始待(dài)測模(mó)板擴增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢出一(yī)個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞;在病毒的(dí)檢測(cè)中,PCR的靈(líng)敏度可達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成單(dān)位(wèi));在細(xì)菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡便,快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶,一次(cì)性地將(jiāng)反應液加好(hǎo)後(hòu),即在(zài)DNA擴增液和水浴鍋上(shàng)進行變(biàn)性-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應,一般在(zài)2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反(fǎn)應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用(yòng)電泳分析(xī),不一(yī)定(dìng)要用同位素(sù),無放射(shè)性(xìng)汙染,易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的(dí)純(chún)度(dù)要求(qiú)低
不(bù)需(xū)要分離(lí)病毒或細菌及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗製(zhì)品及總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為擴增模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如血液,體腔(qiāng)液,洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè),毛發,細胞,活PCR技術概論。
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