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PCR檢測試劑盒
商品(pǐn)屬性
| 產品(pǐn)名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
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鄰(lín)單胞(bāo)菌通(tōng)用PCR檢測試劑(jì)盒 |
Pleisiomonas spp.PCR |
YS-P014600 |
分類：PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲存(cún)條件：-20℃避光保(bǎo)存，避免(miǎn)反復凍融。
運輸(shū)：低(dī)溫，避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期：一(yī)年
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑盒的有效期一(yī)般為1年(nián)，這(zhè)是指在(zài)適當的(dí)儲存(cún)溫度下。核酸擴(kuò)增部分(fēn)的(dí)試(shì)劑(jì)一般要貯存於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測部分試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反(fǎn)復(fù)凍融。
【結果分析條件設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在剛(gāng)好(hǎo)超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質控(kòng)品擴增曲綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結果應為陽性，有明(míng)顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需(xū)在一(yī)次實驗中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則該(gāi)次實(shí)驗視(shì)為(wéi)無效。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯的指數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為可疑樣本；對於(yú)可疑(yí)樣本(běn)建議(yì)復核一次(cì)，若復(fù)核結果Ct<40且有指數擴增期，則判定為陽性(xìng)，否則判定為陰性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑(jì)汙染，樣(yàng)品交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試劑(jì)運輸，保存不(bù)當或試劑(jì)配製(zhì)不準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑(jì)檢測效能(néng)下(xià)降，可能(néng)會導致出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性結果。
PCR反應的(dí)特異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基(jī)因的特異(yì)性與保(bǎo)守(shǒu)性。
鄰單胞菌通用(yòng)PCR檢測試劑盒其中引物與模板(bǎn)的正(zhèng)確(què)結(jié)合(hé)是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與(yǔ)模板的結(jié)合(hé)及引物鏈(liàn)的延伸是遵(zūn)循鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則的(dí)。聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)及Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性，使(shǐ)反應中(zhōng)模板與引物(wù)的結合(復性)可以在(zài)較高的溫(wēn)度(dù)下(xià)進行，結(jié)合的特異(yì)性大(dà)大增加(jiā)，被(bèi)擴增的(dí)靶基因片段也就能保持(chí)很高(gāo)的正(zhèng)確度(dù)。再通過(guò)選擇特(tè)異性和保守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區(qū)，其(qí)特(tè)異性(xìng)程(chéng)度就更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成量是(shì)以(yǐ)指數方式增(zēng)加的(dí)，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始(shǐ)待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞中檢出一(yī)個靶細(xì)胞；在病毒(dú)的檢測中，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單位)；在細菌學中zui小檢(jiǎn)出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶(méi)，一次性(xìng)地將(jiāng)反應液(yè)加(jiā)好後，即在DNA擴增液和水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行(háng)變性-退火-延伸反應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小時完成(chéng)擴增反(fǎn)應。擴(kuò)增產物一般(bān)用電(diàn)泳(yǒng)分析，不(bù)一定要(yào)用同(tóng)位素，無放射性汙染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度(dù)要求低(dī)
不需(xū)要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒或細(xì)菌(jūn)及培養(yǎng)細胞，DNA 粗製品及總RNA均可作(zuò)為擴增模板(bǎn)。可(kě)直接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本如(rú)血(xiě)液，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發，細胞，活PCR技(jì)術(shù)概(gài)論。
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