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PCR檢測試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英(yīng)文(wén)名稱 | 貨號(hào) |
| 豬冠狀(zhuàng)病毒PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé) |
Porcine Delta Coronavirus（PDCV）DELTARTPCR |
YS-P014610 |
分(fēn)類：PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運輸：低(dī)溫，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的(dí)有效(xiào)期一(yī)般為1年(nián)，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當(dāng)的儲存溫(wēn)度下。核酸擴增部(bù)分的試劑(jì)一般(bān)要貯存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部分試劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免反復凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析(xī)條件設定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾值(zhí)綫設定在(zài)剛(gāng)好超過(guò)正(zhèng)常陰性質(zhì)控(kòng)品擴增曲綫(xiàn)的最高點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控品的檢測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng)，有明顯的指數擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應小於等於35；
3. 以上要(yào)求需(xū)在(zài)一(yī)次實驗中(zhōng)同(tóng)時滿足(zú)，否則(zé)該(gāi)次實驗視為無(wú)效(xiào)。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明顯的指數(shù)擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為(wéi)可疑樣本；對於可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建議(yì)復(fù)核一次，若(ruò)復核結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴增期，則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽性，否(fǒu)則判定為陰性；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值均判定為陰性(xìng)樣本。
【對檢驗(yàn)結果(guǒ)的解釋】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑汙染，樣(yàng)品交叉汙染會(huì)出(chū)現假陽性結(jié)果；
2. 試劑運輸，保存不當或(huò)試(shì)劑(jì)配製不(bù)準確引起的試(shì)劑檢(jiǎn)測效能下(xià)降(jiàng)，可(kě)能會(huì)導(dǎo)致出現假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反(fǎn)應的特異性(xìng)：
②鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基(jī)因(yīn)的(dí)特異性與(yǔ)保守性。
豬冠狀病毒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒其中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的正確(què)結(jié)合是關鍵。引物(wù)與模(mó)板的結(jié)合及引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的延(yán)伸是遵(zūn)循鹼基配對原(yuán)則的。聚合酶合(hé)成反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚合酶(méi)耐高(gāo)溫性，使反應中模(mó)板與引(yǐn)物的結(jié)合(復(fù)性)可以(yǐ)在(zài)較高的溫(wēn)度下(xià)進行，結合的特(tè)異(yì)性大(dà)大增(zēng)加，被(bèi)擴增的靶基因片段(duàn)也就能保持很高(gāo)的(dí)正確度。再通(tōng)過選(xuǎn)擇(zé)特異性(xìng)和(hé)保守性(xìng)高的(dí)靶基因區，其(qí)特(tè)異性(xìng)程度就更高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增加的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待測(cè)模板擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢出一(yī)個靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單(dān)位(wèi))；在細(xì)菌學中zui小(xiǎo)檢出率為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次性(xìng)地(dì)將反應(yīng)液加好後(hòu)，即在(zài)DNA擴增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進(jìn)行(háng)變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般在2～4 小時完(wán)成(chéng)擴增反應。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物(wù)一般用電泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不(bù)一定(dìng)要(yào)用(yòng)同位素(sù)，無放(fàng)射性汙染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純度要求(qiú)低
不需要分離病(bìng)毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及培養細(xì)胞，DNA 粗製品及總RNA均可作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增模板(bǎn)。可直接用臨(lín)床標(biāo)本如血(xiě)液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽液，毛發，細胞，活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論。
