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PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
豬生殖與呼吸綜合(hé)症(zhèng)病(bìng)毒美(měi)洲株PCR檢測試(shì)劑盒
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英文名稱(chēng) | 貨(huò)號(hào) |
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豬生(shēng)殖與(yǔ)呼吸(xī)綜合症病(bìng)毒美(měi)洲(zhōu)株PCR檢測(cè)試劑盒 |
Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus North America Strain(PRRSV NA) RTPCR |
YS-P014618 |
分類:PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒
儲存條件:-20℃避(bì)光保(bǎo)存,避(bì)免反(fǎn)復凍融。
運(yùn)輸:低溫(wēn),避光(guāng)。
有效期(qī):一年(nián)
貨期(qī):現貨PCR試劑盒的有效期(qī)一(yī)般為1年(nián),這(zhè)是指在(zài)適(shì)當(dāng)的儲存溫度(dù)下(xià)。核酸擴(kuò)增部分的試劑一(yī)般(bān)要(yào)貯存(cún)於-20℃下,產(chǎn)物檢測部分試劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免(miǎn)反復凍融(róng)。
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng):將(jiāng)閾(yù)值綫設定在剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰(yīn)性質控品(pǐn)擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最高點。
2. 陽性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽性,有(yǒu)明顯的指數(shù)擴增期,Ct值(zhí)應小於(yú)等(děng)於35;
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需在一次(cì)實驗中(zhōng)同(tóng)時滿足(zú),否則該次實(shí)驗視為無效。
2.可疑(yí):有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī),且(qiě)38≤Ct<40,此時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可疑樣本;對於可疑(yí)樣本建議(yì)復核(hé)一次(cì),若(ruò)復(fù)核(hé)結果Ct<40且有指數擴增(zēng)期,則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽性,否則(zé)判(pàn)定為陰性(xìng);
3. 陰(yīn)性:無指數擴(kuò)增期(qī),Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗結果的解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙(wū)染,試劑(jì)汙(wū)染,樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙染(rǎn)會出現(xiàn)假陽性結(jié)果(guǒ);
2. 試(shì)劑運輸,保(bǎo)存不當或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準確引起的試(shì)劑檢測(cè)效(xiào)能(néng)下(xià)降,可能(néng)會導(dǎo)致出現假陰性結果。
②鹼基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性;
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的(dí)特異(yì)性與保守性(xìng)。
豬生(shēng)殖與呼吸綜合症(zhèng)病毒(dú)美洲(zhōu)株PCR檢測試(shì)劑盒其中引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)正(zhèng)確結(jié)合是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板(bǎn)的結合及(jí)引物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵(zūn)循鹼基配對原則的。聚(jù)合酶合成(chéng)反應的忠(zhōng)實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫(wēn)性,使反應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與引物的(dí)結(jié)合(復(fù)性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的溫度下(xià)進行,結合(hé)的特(tè)異(yì)性(xìng)大大增(zēng)加,被擴增的靶基(jī)因片段也就(jiù)能保持(chí)很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確(què)度(dù)。再通(tōng)過選擇特異(yì)性和(hé)保守性(xìng)高的靶基(jī)因區,其特(tè)異(yì)性(xìng)程度(dù)就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生成量是以指(zhǐ)數方式(shì)增(zēng)加的(dí),能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始待(dài)測模(mó)板擴(kuò)增到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細胞(bāo)中檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶細(xì)胞(bāo);在病毒(dú)的檢測中,PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位(wèi));在細(xì)菌學中zui小檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便,快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶,一(yī)次性(xìng)地將(jiāng)反應液(yè)加好後,即在(zài)DNA擴(kuò)增液(yè)和(hé)水浴鍋上進(jìn)行變(biàn)性(xìng)-退火(huǒ)-延伸(shēn)反應,一般在2~4 小(xiǎo)時完成擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增產物(wù)一般(bān)用電(diàn)泳(yǒng)分析,不一(yī)定要(yào)用同位素,無(wú)放射性(xìng)汙染,易(yì)推廣。
(4) 對標本(běn)的純(chún)度(dù)要求低
不需(xū)要分離(lí)病毒或(huò)細菌及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞(bāo),DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作為擴(kuò)增模(mó)板。可(kě)直接用臨床標本如血液,體(tǐ)腔(qiāng)液(yè),洗(xǐ)嗽液,毛發,細胞(bāo),活(huó)PCR技術概(gài)論(lùn)。
