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PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
豬(zhū)生(shēng)殖與(yǔ)呼吸(xī)綜合(hé)症(zhèng)病(bìng)毒歐(ōu)洲株PCR檢(jiǎn)測試劑盒
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產品名稱(chēng) | 英文(wén)名稱 | 貨(huò)號(hào) |
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豬(zhū)生殖(zhí)與(yǔ)呼吸(xī)綜合症病毒(dú)歐洲株PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒 |
Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Europe Strain (PRRSV Europe)RTPCR |
YS-P014617 |
分類：PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
儲存條件：-20℃避光保(bǎo)存，避(bì)免(miǎn)反復凍融。
運輸：低溫(wēn)，避光。
有(yǒu)效(xiào)期：一(yī)年
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的有效(xiào)期一(yī)般為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當的儲存溫(wēn)度(dù)下。核酸擴增部分(fēn)的(dí)試(shì)劑一(yī)般要貯存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢測(cè)部分(fēn)試劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結果分(fēn)析條件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值綫設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常陰(yīn)性(xìng)質控品擴增曲綫的(dí)最高點(diǎn)。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽性，有(yǒu)明顯的指數擴增(zēng)期(qī)，Ct值應小於等於35；
3. 以上要求需在(zài)一次實(shí)驗中(zhōng)同時滿足，否則該次實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效。
【結果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有明顯的指數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為可(kě)疑樣本；對(duì)於(yú)可(kě)疑(yí)樣本建議復(fù)核(hé)一(yī)次(cì)，若(ruò)復核結果Ct<40且有(yǒu)指數擴增(zēng)期，則(zé)判(pàn)定(dìng)為陽性，否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰性：無指數擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判定(dìng)為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗室(shì)環境(jìng)汙染，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣品交叉(chā)汙染(rǎn)會出(chū)現假陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運輸，保存不(bù)當或試劑(jì)配製不準確引起(qǐ)的(dí)試(shì)劑(jì)檢測(cè)效能(néng)下降，可能會導(dǎo)致出現假陰性結果。
PCR反應(yīng)的特異性(xìng)：
②鹼基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性；
④靶(bǎ)基因的特異性(xìng)與(yǔ)保守(shǒu)性。
豬生(shēng)殖(zhí)與呼(hū)吸綜合(hé)症病毒歐洲(zhōu)株PCR檢測試劑盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的正確結合(hé)是(shì)關鍵。引物與模板的(dí)結合及引物鏈的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐高溫性(xìng)，使反應中(zhōng)模板與引物(wù)的結(jié)合(復性)可(kě)以(yǐ)在較高(gāo)的(dí)溫度(dù)下(xià)進(jìn)行，結(jié)合(hé)的特(tè)異性(xìng)大大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴增的(dí)靶(bǎ)基因片段也就能保(bǎo)持很高(gāo)的正確(què)度。再通過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性(xìng)和保(bǎo)守性(xìng)高的靶基因區(qū)，其(qí)特(tè)異(yì)性(xìng)程度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產物(wù)的生(shēng)成量(liáng)是以(yǐ)指數方(fāng)式(shì)增(zēng)加(jiā)的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的靈敏(mǐn)度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單(dān)位(wèi))；在細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一次性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行變(biàn)性(xìng)-退火-延伸(shēn)反(fǎn)應，一(yī)般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成擴增反(fǎn)應。擴(kuò)增產(chǎn)物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析，不(bù)一定要用(yòng)同位(wèi)素，無放(fàng)射(shè)性汙染，易推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純(chún)度要求(qiú)低(dī)
不需要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及培養細胞，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均可作(zuò)為擴增模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標本如血(xiě)液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽液(yè)，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活PCR技(jì)術概論。
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