產品中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
豬(zhū)生(shēng)殖與呼(hū)吸(xī)綜合(hé)症病毒(dú)通(tōng)用PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
| 產品名稱 | 英(yīng)文名(míng)稱 | 貨(huò)號 |
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豬生殖與呼吸(xī)綜合(hé)症病(bìng)毒(dú)通用PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus(PRRSV)RTPCR |
YS-P014619 |
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件(jiàn):-20℃避光保存(cún),避免反復凍融。
運輸:低溫(wēn),避光(guāng)。
有效期(qī):一年(nián)
貨期:現(xiàn)貨PCR試劑盒的有效期一(yī)般為1年,這是指(zhǐ)在適當的儲存(cún)溫度下(xià)。核酸擴增部分的試(shì)劑(jì)一(yī)般要貯存(cún)於(yú)-20℃下,產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部分試(shì)劑則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反(fǎn)復凍融(róng)。
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng):將閾值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品擴(kuò)增曲綫的最(zuì)高點。
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性(xìng),有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數擴增期(qī),Ct值(zhí)應小於等(děng)於(yú)35;
3. 以上要求(qiú)需(xū)在(zài)一次(cì)實(shí)驗中同(tóng)時滿足,否則(zé)該次實驗視為無(wú)效。
2.可(kě)疑(yí):有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī),且(qiě)38≤Ct<40,此時樣本(běn)為可(kě)疑樣本(běn);對(duì)於可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復(fù)核一(yī)次(cì),若復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增期,則(zé)判(pàn)定(dìng)為陽性,否(fǒu)則判定(dìng)為陰(yīn)性;
3. 陰(yīn)性:無(wú)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期,Ct=40或無Ct值均判定為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果的解釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環境汙染,試劑汙染(rǎn),樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染會(huì)出現假(jiǎ)陽性結果;
2. 試(shì)劑運(yùn)輸,保(bǎo)存不當(dāng)或試劑配製不(bù)準確(què)引起(qǐ)的試劑(jì)檢測(cè)效(xiào)能下(xià)降(jiàng),可(kě)能會導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
②鹼基(jī)配對原則;
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應的忠實(shí)性;
④靶(bǎ)基(jī)因的特異性與保守(shǒu)性(xìng)。
豬(zhū)生(shēng)殖(zhí)與(yǔ)呼吸綜(zōng)合症(zhèng)病(bìng)毒(dú)通用PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的正確(què)結合是關鍵(jiàn)。引物與模(mó)板的結(jié)合及(jí)引物鏈的(dí)延(yán)伸是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基(jī)配對原則的(dí)。聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐高溫性,使反應中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結(jié)合(復性(xìng))可(kě)以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行,結(jié)合(hé)的特(tè)異(yì)性(xìng)大大增(zēng)加(jiā),被擴增的(dí)靶基因(yīn)片段也就(jiù)能(néng)保持(chí)很高(gāo)的(dí)正確(què)度。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇特(tè)異(yì)性(xìng)和保(bǎo)守性(xìng)高的靶基(jī)因區(qū),其(qí)特異性程(chéng)度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成(chéng)量是(shì)以指數方(fāng)式(shì)增加的(dí),能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個細胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一個靶細胞(bāo);在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢測(cè)中(zhōng),PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成單位(wèi));在細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便,快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐高溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi),一(yī)次性地將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後(hòu),即在(zài)DNA擴增(zēng)液和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進行變(biàn)性-退(tuì)火-延(yán)伸反應,一般在2~4 小(xiǎo)時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一(yī)般用(yòng)電泳(yǒng)分析(xī),不(bù)一定要(yào)用同位素,無(wú)放射性(xìng)汙(wū)染,易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的純度要(yào)求(qiú)低
不需要分離病毒或細菌及培(péi)養細(xì)胞,DNA 粗製品及(jí)總RNA均可作為(wéi)擴增模(mó)板。可直(zhí)接用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標本如(rú)血液(yè),體腔液(yè),洗嗽液(yè),毛(máo)發(fā),細胞(bāo),活(huó)PCR技(jì)術(shù)概(gài)論(lùn)。
