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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)
大腸杆(gān)菌(jūn)通(tōng)用型核酸(suān)檢測試劑盒(熒光(guāng) PCR 法(fǎ))
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2024-11-25 瀏覽(lǎn)次(cì)數(shù)：930
商品屬性(xìng)
| 產品名稱(chēng) | 規格(gé) | 貨(huò)號(hào) |
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大(dà)腸(cháng)杆(gān)菌通用型(xíng)核(hé)酸(suān)檢測試(shì)劑盒(熒光(guāng) PCR 法(fǎ)) |
50T |
YS-SM5520 |
儲存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避免反復(fù)凍(dòng)融。
運輸：低(dī)溫，避光。
有效期(qī)：一年
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的有效期一般為1年，這是指在適當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增部分的試劑(jì)一般要貯存於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測部(bù)分試劑(jì)則(zé)貯存於2-8℃。盡量避免反復(fù)凍融。
【結果分析條件設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫設定在剛好(hǎo)超(chāo)過正常陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢測結(jié)果應為陽性(xìng)，有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等(děng)於35；
3. 以上要求需在一(yī)次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時滿(mǎn)足，否則該(gāi)次(cì)實(shí)驗視為無效。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本(běn)；對(duì)於(yú)可疑樣本建議復核一次，若(ruò)復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數擴增期(qī)，則(zé)判定(dìng)為陽性(xìng)，否則判定為陰性(xìng)；
3. 陰性：無指數擴(kuò)增期，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對檢驗(yàn)結果的解釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境汙染，試(shì)劑汙染，樣品交(jiāo)叉汙染(rǎn)會(huì)出現假陽性(xìng)結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不當或試劑(jì)配製不準(zhǔn)確引起(qǐ)的(dí)試劑檢測(cè)效(xiào)能下降，可(kě)能(néng)會導致出現(xiàn)假陰性結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特(tè)異性：
②鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基因的特(tè)異(yì)性與保守性。
大(dà)腸杆(gān)菌(jūn)通(tōng)用(yòng)型(xíng)核酸檢測試劑盒(熒(yíng)光 PCR 法)其(qí)中(zhōng)引物(wù)與模板的(dí)正(zhèng)確結合是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板的結(jié)合及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵循鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶合成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合酶(méi)耐高(gāo)溫性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中模板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物的結(jié)合(復性(xìng))可(kě)以在(zài)較高的(dí)溫(wēn)度下進行(háng)，結(jié)合的特異性大大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴增的(dí)靶基(jī)因片段也就能保(bǎo)持很(hěn)高的正確(què)度(dù)。再(zài)通過(guò)選擇特異(yì)性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性高(gāo)的靶基因區(qū)，其(qí)特異性程(chéng)度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物的(dí)生(shēng)成(chéng)量是以指數(shù)方(fāng)式增(zēng)加的，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級的起始待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個細胞(bāo)中檢出(chū)一個(gè)靶細胞；在(zài)病毒的檢測中，PCR的靈敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑(bān)形成單(dān)位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶，一次(cì)性地將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好後，即在DNA擴(kuò)增液和水浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反應，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增產(chǎn)物(wù)一般用電泳分(fēn)析，不(bù)一定要(yào)用同位素，無(wú)放射(shè)性汙(wū)染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度要(yào)求低(dī)
不需(xū)要(yào)分離病毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及(jí)總RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增模板。可(kě)直接用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血液，體腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發(fā)，細胞，活PCR技(jì)術(shù)概論。
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