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PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
魏(wèi)氏無(wú)綠(lǜ)藻PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨號(hào) |
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魏氏無(wú)綠(lǜ)藻PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé) |
Prototheca wickerhamiiPCR |
YS-P014642 |
分類:PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
儲(chǔ)存條件(jiàn):-20℃避光(guāng)保存,避免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。
運輸:低溫,避光。
有效期:一年
貨期:現(xiàn)貨PCR試劑盒的有(yǒu)效期(qī)一般為(wéi)1年,這是指在適當(dāng)的儲存(cún)溫度下(xià)。核(hé)酸擴增(zēng)部分的(dí)試(shì)劑一(yī)般要貯(zhù)存於-20℃下,產(chǎn)物檢(jiǎn)測部分試劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免反(fǎn)復凍融(róng)。
u 閾值(zhí)(Threshold)設定:將閾(yù)值綫設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超過(guò)正常陰性質(zhì)控品擴增曲綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的檢測結果應為(wéi)陽(yáng)性,有明(míng)顯的指數(shù)擴(kuò)增期(qī),Ct值(zhí)應小於等(děng)於(yú)35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需(xū)在一次實(shí)驗(yàn)中同時滿足,否則該(gāi)次實驗(yàn)視(shì)為無效(xiào)。
2.可疑:有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增期,且(qiě)38≤Ct<40,此時樣(yàng)本為可疑(yí)樣(yàng)本;對於可(kě)疑樣本(běn)建(jiàn)議復核一(yī)次(cì),若復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增期,則(zé)判定為陽性(xìng),否則判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng);
3. 陰(yīn)性:無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期,Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室(shì)環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn),試劑(jì)汙染,樣品(pǐn)交叉汙(wū)染會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結(jié)果;
2. 試劑(jì)運輸,保存不當(dāng)或(huò)試劑配(pèi)製不準確(què)引起的(dí)試(shì)劑(jì)檢測效能(néng)下降,可能(néng)會(huì)導致出(chū)現假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果。
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原則;
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反應的忠實(shí)性;
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特異(yì)性與保守性(xìng)。
魏(wèi)氏(shì)無綠藻(zǎo)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)其中引物與(yǔ)模板的(dí)正(zhèng)確結合是關(guān)鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模板的(dí)結(jié)合及(jí)引(yǐn)物鏈的延伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則的(dí)。聚合酶合成反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高(gāo)溫性(xìng),使反應中(zhōng)模板與引(yǐn)物(wù)的(dí)結合(復(fù)性)可(kě)以在較高的溫(wēn)度下(xià)進行(háng),結合的(dí)特(tè)異性(xìng)大大增加(jiā),被擴(kuò)增的(dí)靶基因片(piàn)段(duàn)也就能保(bǎo)持很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度。再通過(guò)選擇(zé)特異性(xìng)和保守(shǒu)性高(gāo)的靶基因(yīn)區,其(qí)特異性程度就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的生成量(liáng)是以(yǐ)指數(shù)方式(shì)增(zēng)加的(dí),能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬個細胞(bāo)中(zhōng)檢出(chū)一個靶細胞(bāo);在(zài)病毒的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng),PCR的靈敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單(dān)位);在細(xì)菌學中zui小檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便,快速
PCR反應用耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi),一次性(xìng)地將(jiāng)反應(yīng)液加好(hǎo)後,即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進行變性(xìng)-退(tuì)火-延伸(shēn)反(fǎn)應,一(yī)般在(zài)2~4 小時完成(chéng)擴增反(fǎn)應(yīng)。擴增(zēng)產(chǎn)物一般(bān)用電(diàn)泳分(fēn)析(xī),不一定要(yào)用(yòng)同(tóng)位素,無放射性汙(wū)染,易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純(chún)度要(yào)求低(dī)
不需要(yào)分離病(bìng)毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及培養細胞(bāo),DNA 粗(cū)製品及總RNA均可作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增模板。可直接用(yòng)臨床標本(běn)如(rú)血液(yè),體(tǐ)腔液,洗嗽液,毛(máo)發,細胞,活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論。
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