產(chǎn)品中心
PCR檢測試劑盒
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文名(míng)稱 | 貨號 |
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立(lì)克次體(tǐ)通(tōng)用PCR檢測試(shì)劑(jì)盒 |
Rickettsia spp.PCR |
YS-P014686 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避(bì)光(guāng)保存(cún)，避(bì)免(miǎn)反復凍融。
運輸(shū)：低溫，避光(guāng)。
有效(xiào)期：一年
貨(huò)期：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的(dí)有效期一般(bān)為(wéi)1年，這是指(zhǐ)在適(shì)當的儲(chǔ)存(cún)溫度下(xià)。核酸擴增部分的試(shì)劑(jì)一般要貯(zhù)存(cún)於-20℃下，產物檢測(cè)部分(fēn)試劑則貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結果分析(xī)條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾值綫設(shè)定(dìng)在剛好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常陰(yīn)性質控品擴(kuò)增曲綫的最高(gāo)點。
【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控(kòng)品的檢測(cè)結果應(yīng)為陽性，有明(míng)顯的指數(shù)擴增期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需在一次實驗中(zhōng)同時滿足(zú)，否則該(gāi)次實(shí)驗視(shì)為無(wú)效。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明顯的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為(wéi)可(kě)疑樣本；對於可疑(yí)樣本建議復核一次，若復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，則判定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性，否(fǒu)則判定為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的解(jiě)釋】
1. 實驗室環境汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉汙染會出現假陽性結果；
2. 試(shì)劑運輸，保(bǎo)存(cún)不(bù)當(dāng)或試(shì)劑配(pèi)製不準確(què)引起的試(shì)劑(jì)檢測效能下(xià)降(jiàng)，可能會(huì)導致出(chū)現假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的特(tè)異性(xìng)：
②鹼基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因的(dí)特(tè)異(yì)性與保守性(xìng)。
立克次體通用(yòng)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引物與(yǔ)模(mó)板的(dí)正(zhèng)確結合(hé)是關(guān)鍵。引物(wù)與模板(bǎn)的結(jié)合及(jí)引物鏈(liàn)的(dí)延伸是遵循鹼基配(pèi)對原則的(dí)。聚合酶合成反應的(dí)忠實性及Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性，使反應(yīng)中模板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的結合(復(fù)性)可以(yǐ)在較高(gāo)的溫度下進行(háng)，結合(hé)的特(tè)異性(xìng)大大增(zēng)加，被擴(kuò)增的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片(piàn)段(duàn)也就能(néng)保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的正確(què)度。再(zài)通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇特異性和保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基因區，其特(tè)異(yì)性程度就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量是以(yǐ)指(zhǐ)數方式(shì)增加的(dí)，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始(shǐ)待測(cè)模(mó)板擴(kuò)增到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬(wàn)個細胞中檢出一個(gè)靶(bǎ)細胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的檢測中，PCR的(dí)靈敏度(dù)可達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢(jiǎn)出(chū)率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應(yīng)用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液(yè)加(jiā)好後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液和水浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行變(biàn)性(xìng)-退火(huǒ)-延伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴(kuò)增反(fǎn)應(yīng)。擴增(zēng)產物一般(bān)用電泳(yǒng)分析，不(bù)一(yī)定要用同(tóng)位素(sù)，無(wú)放射性汙(wū)染，易推廣。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度(dù)要求低
不需(xū)要分離(lí)病(bìng)毒或(huò)細菌(jūn)及(jí)培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總RNA均可作為擴增模(mó)板。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨床標(biāo)本如(rú)血液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術概論。
