產(chǎn)品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑盒
哈(hā)達(dá)爾沙門(mén)氏菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名(míng)稱 | 貨號 |
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哈達(dá)爾沙門(mén)氏菌(jūn)PCR檢測(cè)試(shì)劑盒 |
Salmonella hadarPCR |
YS-P014708 |
分(fēn)類(lèi):PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
儲(chǔ)存(cún)條件(jiàn):-20℃避光保存(cún),避免反復凍(dòng)融(róng)。
運輸:低溫,避光。
有效期(qī):一年
貨期(qī):現貨PCR試(shì)劑盒的(dí)有效期(qī)一般為1年,這(zhè)是指在(zài)適當的儲(chǔ)存溫度(dù)下。核酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分的(dí)試劑(jì)一般要貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià),產物(wù)檢測(cè)部(bù)分(fēn)試(shì)劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避免反(fǎn)復(fù)凍融。
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng):將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛好超過(guò)正常陰(yīn)性質(zhì)控品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最高(gāo)點。
2. 陽性質控品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果應(yīng)為(wéi)陽性,有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴增期,Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等(děng)於35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求需在一次實驗中同(tóng)時滿(mǎn)足(zú),否則該次(cì)實(shí)驗(yàn)視(shì)為無效。
2.可(kě)疑:有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期,且38≤Ct<40,此時樣本為可(kě)疑(yí)樣(yàng)本;對(duì)於(yú)可(kě)疑樣本(běn)建議復核一次,若復(fù)核結果Ct<40且有指數擴(kuò)增期,則判(pàn)定為陽(yáng)性(xìng),否則(zé)判定為(wéi)陰性;
3. 陰性:無(wú)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期,Ct=40或(huò)無Ct值均判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗結果(guǒ)的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境汙染,試劑(jì)汙染,樣品(pǐn)交叉汙(wū)染(rǎn)會出現假陽(yáng)性結果;
2. 試劑運(yùn)輸,保(bǎo)存(cún)不(bù)當或試劑(jì)配(pèi)製不(bù)準確引起(qǐ)的(dí)試劑檢測效能(néng)下(xià)降(jiàng),可能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結果(guǒ)。
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原則;
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保(bǎo)守性(xìng)。
哈達爾沙門(mén)氏菌(jūn)PCR檢測試劑盒(hé)其中引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)正(zhèng)確結(jié)合(hé)是關(guān)鍵。引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)結合及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的延(yán)伸是遵(zūn)循鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶合成反(fǎn)應的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高溫性(xìng),使(shǐ)反應(yīng)中模(mó)板與引(yǐn)物的結(jié)合(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較高的(dí)溫(wēn)度下(xià)進行(háng),結(jié)合的(dí)特(tè)異性大(dà)大增(zēng)加,被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基因片(piàn)段也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持(chí)很高(gāo)的正(zhèng)確度。再(zài)通過(guò)選擇特異(yì)性和保守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶基因區(qū),其(qí)特異性(xìng)程(chéng)度就(jiù)更高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成(chéng)量是以(yǐ)指(zhǐ)數方(fāng)式增(zēng)加的(dí),能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模板(bǎn)擴增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一個(gè)靶細胞(bāo);在病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測中,PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位);在細菌(jūn)學(xué)中zui小檢出(chū)率為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn),快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi),一(yī)次性地將反(fǎn)應液加好後(hòu),即在DNA擴增液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進行變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延(yán)伸反應,一般在(zài)2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應。擴(kuò)增(zēng)產物一般用(yòng)電(diàn)泳分析,不一(yī)定要用同位素(sù),無放射性汙染(rǎn),易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純度(dù)要求(qiú)低
不需要(yào)分離病毒(dú)或(huò)細(xì)菌及培養細胞(bāo),DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均(jūn)可作為(wéi)擴(kuò)增模板(bǎn)。可直接用臨(lín)床標(biāo)本(běn)如(rú)血液,體(tǐ)腔液,洗嗽液,毛(máo)發,細(xì)胞,活(huó)PCR技(jì)術概論(lùn)。
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