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PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
海(hǎi)德堡沙門氏(shì)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
| 產品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
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海德(dé)堡(bǎo)沙門(mén)氏(shì)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé) |
Salmonella heidelbergPCR |
YS-P014709 |
分(fēn)類(lèi):PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲存(cún)條件(jiàn):-20℃避(bì)光保存(cún),避免反(fǎn)復凍融(róng)。
運(yùn)輸(shū):低溫(wēn),避光。
有效(xiào)期(qī):一年(nián)
貨(huò)期:現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的(dí)有效(xiào)期一(yī)般為1年,這是指在適(shì)當的儲存(cún)溫(wēn)度下。核(hé)酸擴(kuò)增部分的試劑一般要貯存於-20℃下,產(chǎn)物檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量避免反復凍(dòng)融(róng)。
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng):將閾值綫設(shè)定在(zài)剛(gāng)好超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰性質(zhì)控品擴增曲(qū)綫的最高(gāo)點(diǎn)。
2. 陽性(xìng)質控品的檢測(cè)結果應為陽(yáng)性,有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期,Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35;
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需(xū)在一次實驗中(zhōng)同時滿足(zú),否則(zé)該次實(shí)驗視為(wéi)無效(xiào)。
2.可疑(yí):有明顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時樣(yàng)本為(wéi)可疑(yí)樣本;對於(yú)可疑樣(yàng)本建(jiàn)議復(fù)核(hé)一(yī)次,若復核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增期,則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性,否(fǒu)則判定為陰(yīn)性(xìng);
3. 陰性:無指數(shù)擴增期,Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙(wū)染(rǎn),試(shì)劑汙(wū)染,樣品交叉汙(wū)染會出現假陽性(xìng)結果(guǒ);
2. 試劑運(yùn)輸,保(bǎo)存不當(dāng)或試劑配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的試(shì)劑檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下降,可(kě)能會導致出現假陰性(xìng)結果。
②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原(yuán)則;
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性;
④靶基因的特異性與(yǔ)保守性。
海(hǎi)德堡(bǎo)沙門(mén)氏菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引物與模板的(dí)正確結(jié)合(hé)是關鍵(jiàn)。引物與模板的結(jié)合及引物鏈(liàn)的延伸是(shì)遵循鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以(yǐ)在較(jiào)高的(dí)溫度下進(jìn)行(háng),結(jié)合的特異性(xìng)大大(dà)增(zēng)加,被擴(kuò)增的靶基(jī)因片段也就(jiù)能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇特異性(xìng)和保守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶基因(yīn)區,其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生(shēng)成量是(shì)以指數方(fāng)式增加(jiā)的(dí),能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始待(dài)測模板擴增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從(cóng)100萬個細(xì)胞中檢出一(yī)個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞;在(zài)病毒(dú)的(dí)檢測中,PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位);在(zài)細菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快速
PCR反應用(yòng)耐高溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi),一次(cì)性地將反應(yīng)液加好後,即在(zài)DNA擴增液和水浴鍋上進行變(biàn)性-退(tuì)火-延(yán)伸反應,一般(bān)在(zài)2~4 小時(shí)完成擴增反應。擴增產物一(yī)般用(yòng)電泳分析,不(bù)一(yī)定(dìng)要(yào)用同位素,無放射(shè)性汙(wū)染(rǎn),易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純(chún)度要求(qiú)低(dī)
不需(xū)要分離(lí)病(bìng)毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗製品及總RNA均可(kě)作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直接用臨床(chuáng)標本如血液(yè),體腔液,洗(xǐ)嗽液,毛發(fā),細(xì)胞,活PCR技術概論(lùn)。
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