產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
商品(pǐn)屬性
| 產品名稱 | 英文(wén)名稱 | 貨號 |
|
沙門氏菌通用PCR檢測試劑盒 |
Salmonella spp.PCR |
YS-P014718 |
分(fēn)類：PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存，避免反復凍融(róng)。
運輸：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光(guāng)。
有效期：一(yī)年
貨期：現(xiàn)貨PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效期一般(bān)為1年(nián)，這是指在(zài)適(shì)當的儲存溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增部分(fēn)的試劑(jì)一(yī)般要貯存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢測部(bù)分試劑(jì)則貯存於2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果分(fēn)析條件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾(yù)值綫設定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正常(cháng)陰性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲綫的最高點。
【質(zhì)控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢測結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需在一次(cì)實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時滿足，否(fǒu)則(zé)該次(cì)實驗視為無(wú)效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為可(kě)疑(yí)樣本；對於可疑樣本建(jiàn)議復核一(yī)次(cì)，若復(fù)核結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，則(zé)判定為陽性，否(fǒu)則判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定為陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果的解釋(shì)】
1. 實驗室環境汙染，試(shì)劑(jì)汙染，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染會出(chū)現(xiàn)假陽性結果；
2. 試劑運輸，保存(cún)不當(dāng)或試劑配製不(bù)準(zhǔn)確引起的(dí)試(shì)劑(jì)檢測(cè)效(xiào)能(néng)下降(jiàng)，可能(néng)會導(dǎo)致出現假陰性結果。
PCR反應的(dí)特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反應的忠實性；
④靶基因的特(tè)異(yì)性(xìng)與(yǔ)保守性。
沙(shā)門(mén)氏菌通用PCR檢(jiǎn)測試劑盒其中(zhōng)引物與(yǔ)模板(bǎn)的正確結(jié)合是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模板的(dí)結(jié)合及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的延(yán)伸是(shì)遵循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則的。聚合酶(méi)合成反(fǎn)應的(dí)忠實性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫性(xìng)，使反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物的結(jié)合(復(fù)性(xìng))可以在(zài)較高的溫度(dù)下(xià)進(jìn)行，結合的(dí)特異(yì)性大大(dà)增加，被(bèi)擴增的靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段(duàn)也就(jiù)能(néng)保持很(hěn)高(gāo)的正確度(dù)。再(zài)通(tōng)過選擇特異性(xìng)和保守性高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區(qū)，其(qí)特(tè)異性(xìng)程度(dù)就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的(dí)生成量是以指數方(fāng)式增加(jiā)的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始待(dài)測模板擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個靶細胞(bāo)；在(zài)病毒(dú)的(dí)檢測(cè)中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑形成單(dān)位(wèi))；在細菌學(xué)中zui小檢出率(shuài)為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一(yī)次性(xìng)地(dì)將反應液加好後，即(jí)在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋(guō)上進(jìn)行變性-退火-延(yán)伸反應，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應。擴(kuò)增產物一般用電泳(yǒng)分析，不一定要(yào)用(yòng)同位(wèi)素(sù)，無放射性汙染，易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純(chún)度要求低(dī)
不需要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒或(huò)細菌及培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴增(zēng)模板。可(kě)直接用臨(lín)床(chuáng)標本如血(xiě)液，體(tǐ)腔液，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發，細(xì)胞(bāo)，活PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
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