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PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
大(dà)腸(cháng)埃希(xī)菌(jūn)(大腸O)stx(bp)和(hé)stx(bp)常規PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格(gé) | 貨號(hào) |
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大腸埃希菌(大(dà)腸O)stx(bp)和(hé)stx(bp)常規(guī)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé) |
50T |
YS-P014979 |
儲(chǔ)存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存，避(bì)免反(fǎn)復凍融。
運輸：低溫，避光。
有效期：一(yī)年
貨期：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的(dí)有效期(qī)一(yī)般為1年，這(zhè)是指在(zài)適當的儲存(cún)溫度(dù)下。核酸擴增部分(fēn)的試(shì)劑一般要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分試劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反復凍融。
【結果分析條件設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值綫(xiàn)設定(dìng)在剛好(hǎo)超過(guò)正常陰性質(zhì)控品擴增曲綫(xiàn)的(dí)最高點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測結果(guǒ)應為(wéi)陽性，有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要求需在一次實驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿足(zú)，否(fǒu)則該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為無效。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可疑：有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑樣(yàng)本(běn)；對於(yú)可疑樣(yàng)本建(jiàn)議復(fù)核(hé)一(yī)次，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則(zé)判定為陽(yáng)性，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環境汙(wū)染，試(shì)劑汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結(jié)果；
2. 試劑運(yùn)輸，保(bǎo)存(cún)不當或試劑配(pèi)製不(bù)準確引起的(dí)試劑檢測(cè)效(xiào)能下降，可(kě)能(néng)會(huì)導(dǎo)致出現假(jiǎ)陰性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基因的特(tè)異(yì)性與(yǔ)保守性。
大腸埃希菌(jūn)(大(dà)腸O)stx(bp其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與模板(bǎn)的正(zhèng)確結(jié)合是關鍵。引物與模板的(dí)結(jié)合及引物鏈的延伸是(shì)遵循(xún)鹼基配(pèi)對原則(zé)的。聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫性，使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模板與引(yǐn)物的結(jié)合(hé)(復性)可(kě)以(yǐ)在較高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行，結合的(dí)特異性大大(dà)增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增的靶(bǎ)基因(yīn)片(piàn)段也就能保持很高的(dí)正確度(dù)。再(zài)通(tōng)過選擇(zé)特異性和(hé)保守性(xìng)高的(dí)靶(bǎ)基因區，其(qí)特異(yì)性程(chéng)度就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的生成量是以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板(bǎn)擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細胞；在(zài)病毒的檢測中，PCR的靈敏(mǐn)度可(kě)達3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成單(dān)位(wèi))；在(zài)細(xì)菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合(hé)酶，一次(cì)性(xìng)地將反(fǎn)應液加(jiā)好後(hòu)，即在DNA擴增液和水(shuǐ)浴鍋(guō)上進(jìn)行變(biàn)性-退火-延伸(shēn)反應(yīng)，一(yī)般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增產物一般用電泳(yǒng)分(fēn)析，不一定(dìng)要用同(tóng)位(wèi)素，無(wú)放射性汙染(rǎn)，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的(dí)純(chún)度要求(qiú)低(dī)
不(bù)需要分離(lí)病(bìng)毒或細菌(jūn)及(jí)培養細胞，DNA 粗製品及(jí)總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴增(zēng)模板。可直接用(yòng)臨床(chuáng)標本如血(xiě)液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發，細胞，活(huó)PCR技術概(gài)論(lùn)。
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