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PCR檢測試(shì)劑盒
商(shāng)品屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 規(guī)格(gé) | 貨(huò)號 |
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卡氏(shì)肺胞子蟲(chóng)PCR檢測試劑盒 |
50T |
YS-P015086 |
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保存，避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避光。
有(yǒu)效(xiào)期：一年
貨期：現貨PCR試劑盒的有(yǒu)效期一(yī)般為1年，這是指在(zài)適(shì)當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫度(dù)下(xià)。核酸擴增(zēng)部(bù)分的(dí)試劑(jì)一般要貯存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢(jiǎn)測(cè)部分試(shì)劑(jì)則貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反復凍(dòng)融。
【結果分析條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超過(guò)正(zhèng)常陰(yīn)性質(zhì)控(kòng)品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高(gāo)點。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯的指數擴增(zēng)期，Ct值應小(xiǎo)於等於35；
3. 以(yǐ)上要求需(xū)在一次實(shí)驗中同時滿(mǎn)足，否(fǒu)則該次實驗(yàn)視為無效。
【結果判斷】
2.可(kě)疑：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本(běn)；對於(yú)可(kě)疑樣本(běn)建議(yì)復核一次(cì)，若復(fù)核結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴增期，則(zé)判定為陽性，否(fǒu)則判定為陰性；
3. 陰性：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定為(wéi)陰性樣本。
【對(duì)檢驗結(jié)果的解(jiě)釋】
1. 實驗室環境(jìng)汙染，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交叉(chā)汙(wū)染會出現假陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸，保存(cún)不(bù)當或試劑(jì)配(pèi)製不準確引起的試(shì)劑檢測效能下(xià)降(jiàng)，可(kě)能會導致(zhì)出現(xiàn)假陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反應(yīng)的忠實性(xìng)；
④靶基因(yīn)的(dí)特(tè)異性與保守性(xìng)。
卡(qiǎ)氏肺胞子蟲PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)其(qí)中引物與模板的(dí)正確(què)結合是關鍵(jiàn)。引物與模(mó)板(bǎn)的結(jié)合及引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸(shēn)是(shì)遵循鹼基配(pèi)對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高溫性，使反應中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的(dí)結(jié)合(復性)可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度(dù)下進(jìn)行(háng)，結(jié)合的特異性大大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴增(zēng)的靶基(jī)因(yīn)片段(duàn)也就(jiù)能保(bǎo)持很高的正確度(dù)。再(zài)通過選擇(zé)特(tè)異性(xìng)和保(bǎo)守性高的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區(qū)，其特異性(xìng)程(chéng)度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式(shì)增(zēng)加(jiā)的，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始待測模板(bǎn)擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶細(xì)胞(bāo)；在病毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的(dí)靈敏度(dù)可達3個RFU(空斑形(xíng)成單位)；在細(xì)菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反應(yīng)用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加好後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上進行變(biàn)性-退火-延伸反應，一(yī)般在2～4 小時完成擴增(zēng)反應(yīng)。擴增產物一(yī)般用電泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不一(yī)定(dìng)要用(yòng)同位素，無放射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度要(yào)求低
不需要分(fēn)離病(bìng)毒(dú)或細菌及培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及總RNA均可作為擴增(zēng)模板(bǎn)。可直接用臨床標本(běn)如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術概(gài)論。
