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PCR檢測試劑盒
商(shāng)品屬性
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規格(gé) | 貨號(hào) |
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馬特定(dìng)基(jī)因序列PCR檢測試(shì)劑盒 |
50T |
YS-P015127 |
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存，避免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試(shì)劑盒的有效期(qī)一(yī)般為(wéi)1年，這是指在適當的儲存(cún)溫度下(xià)。核酸(suān)擴增部(bù)分的試(shì)劑(jì)一般(bān)要貯(zhù)存於-20℃下，產物檢測部分試劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
【結(jié)果分析(xī)條件設定】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過正常(cháng)陰性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增(zēng)曲綫的(dí)最(zuì)高(gāo)點。
【質控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品的(dí)檢測(cè)結果應(yīng)為陽性，有明顯的(dí)指數擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小於等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需在一(yī)次實驗中同時(shí)滿足(zú)，否(fǒu)則該次實驗(yàn)視(shì)為無(wú)效(xiào)。
【結果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有明顯的指數擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為可(kě)疑樣本；對於可疑(yí)樣本(běn)建議(yì)復(fù)核(hé)一(yī)次，若復核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增(zēng)期，則(zé)判定為陽(yáng)性，否則判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判定為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果的(dí)解釋】
1. 實驗室(shì)環(huán)境汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉汙(wū)染(rǎn)會出現假陽性結(jié)果；
2. 試(shì)劑運輸，保(bǎo)存(cún)不當或(huò)試劑配製(zhì)不準(zhǔn)確引起的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能下(xià)降，可能(néng)會導致出(chū)現假陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反應的特異性：
②鹼基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基因(yīn)的(dí)特異性與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
馬特(tè)定(dìng)基(jī)因序列PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒 其中引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板的(dí)正(zhèng)確結(jié)合是關鍵(jiàn)。引物(wù)與模板的結合及(jí)引物鏈的延伸是遵(zūn)循鹼基配對原則的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合成反應的忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫(wēn)性，使(shǐ)反應中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物的(dí)結合(hé)(復(fù)性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度下(xià)進(jìn)行，結合的特異性大大增(zēng)加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的靶基因片段也就(jiù)能(néng)保持很高(gāo)的(dí)正確度(dù)。再(zài)通過選擇特異(yì)性和(hé)保守性高(gāo)的(dí)靶基(jī)因區(qū)，其(qí)特異(yì)性(xìng)程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物的生成(chéng)量是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待(dài)測模板(bǎn)擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬個細胞中(zhōng)檢出一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病毒的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位)；在細菌學中zui小檢出(chū)率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi)，一(yī)次性地(dì)將反應(yīng)液加好後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液和(hé)水浴(yù)鍋上進行變性-退火(huǒ)-延(yán)伸反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小時完成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析，不一定要用(yòng)同位素(sù)，無(wú)放射性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本的(dí)純(chún)度要求(qiú)低(dī)
不(bù)需要(yào)分離(lí)病毒或(huò)細菌(jūn)及培養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品及總RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模板(bǎn)。可直(zhí)接用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血液，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發(fā)，細胞，活PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
