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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
商品屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
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貓(māo)衣原體(tǐ)PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
50T |
YS-P015132 |
儲存條件：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避(bì)免反(fǎn)復凍融。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避光。
有(yǒu)效期：一年(nián)
貨(huò)期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的有效(xiào)期一般為(wéi)1年，這是指在適(shì)當(dāng)的儲存溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸擴增部(bù)分(fēn)的試(shì)劑一般(bān)要貯存於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測部(bù)分試劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析條件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定(dìng)在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰(yīn)性質(zhì)控(kòng)品擴增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品的檢測結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽性(xìng)，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應小於(yú)等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要求需(xū)在(zài)一次(cì)實(shí)驗中(zhōng)同時滿足(zú)，否(fǒu)則該次(cì)實(shí)驗視為(wéi)無效。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可疑：有明顯的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑樣本(běn)；對於可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復核一次(cì)，若(ruò)復(fù)核(hé)結果Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增期，則(zé)判定為陽(yáng)性(xìng)，否則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均(jūn)判定為陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境汙(wū)染，試劑汙(wū)染，樣品交叉(chā)汙染會出現(xiàn)假陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運輸(shū)，保(bǎo)存不(bù)當或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引起(qǐ)的試劑檢測效能下降，可(kě)能(néng)會導致出現假陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應的特(tè)異性(xìng)：
②鹼基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性；
④靶基(jī)因(yīn)的特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保守(shǒu)性(xìng)。
貓(māo)衣(yī)原體PCR檢測試劑盒其(qí)中引物與(yǔ)模板的正確結(jié)合(hé)是關(guān)鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模板的(dí)結合及引物鏈的(dí)延伸是(shì)遵循鹼基配(pèi)對原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合酶合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠實性及Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫(wēn)性，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的(dí)結(jié)合(復性)可以在較高的溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行(háng)，結合(hé)的特異(yì)性大大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴增的靶(bǎ)基因片(piàn)段也(yě)就能保持很高(gāo)的正確度。再通(tōng)過(guò)選擇特異性和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高的靶基因區，其特異性(xìng)程度就更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的(dí)生成量(liáng)是以指數方(fāng)式增(zēng)加的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的(dí)起始(shǐ)待(dài)測模(mó)板擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬(wàn)個細(xì)胞中檢(jiǎn)出一(yī)個靶細胞；在病毒的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度(dù)可達(dá)3個RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位(wèi))；在細菌(jūn)學(xué)中zui小檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應液加(jiā)好後，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水浴(yù)鍋上(shàng)進行(háng)變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延(yán)伸反應，一(yī)般在(zài)2～4 小時(shí)完(wán)成擴增反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不一定要用同位素，無放(fàng)射(shè)性汙染，易推廣。
(4) 對標本的純(chún)度要(yào)求低
不需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒或細(xì)菌(jūn)及培養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如(rú)血(xiě)液，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛(máo)發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術(shù)概論(lùn)。
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