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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)
商品屬(shǔ)性
| 產品名稱 | 規格(gé) | 貨(huò)號 |
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毛滴(dī)蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015133 |
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存，避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效期(qī)：一年(nián)
貨期：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的有(yǒu)效期一(yī)般(bān)為(wéi)1年，這是指在(zài)適當(dāng)的(dí)儲存溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴增(zēng)部分的(dí)試劑一(yī)般(bān)要(yào)貯存於(yú)-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測(cè)部分試劑(jì)則貯存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分析(xī)條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值綫(xiàn)設定在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過正常(cháng)陰(yīn)性質控品擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控品(pǐn)的檢測結(jié)果(guǒ)應為陽(yáng)性，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需在(zài)一次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時滿足(zú)，否(fǒu)則該次(cì)實驗(yàn)視為無效。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本為可(kě)疑樣本(běn)；對於(yú)可疑樣本建(jiàn)議復核(hé)一(yī)次(cì)，若(ruò)復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，則判定為(wéi)陽性，否(fǒu)則(zé)判定為陰性(xìng)；
3. 陰性：無指數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境(jìng)汙(wū)染，試劑(jì)汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會出(chū)現假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū)，保存不(bù)當或試(shì)劑配(pèi)製不準確引起(qǐ)的試(shì)劑檢測效能下降，可能(néng)會導致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的特(tè)異(yì)性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異性與保守性(xìng)。
毛(máo)滴蟲PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引物與模板(bǎn)的正確結合是關鍵。引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)結合及引物(wù)鏈的延伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則的。聚合(hé)酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性，使反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引物的結合(復性)可以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度下進行，結(jié)合的特(tè)異性大大增加(jiā)，被擴增(zēng)的(dí)靶基因(yīn)片段(duàn)也就能保持(chí)很高的(dí)正確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇特異(yì)性和保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因區，其特異(yì)性程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量(liáng)是以指數(shù)方式增(zēng)加的，能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始待(dài)測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出(chū)一(yī)個(gè)靶細胞；在病(bìng)毒的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可(kě)達3個RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位)；在(zài)細菌學中zui小檢出(chū)率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一次性(xìng)地(dì)將反應(yīng)液加好後，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行變性(xìng)-退(tuì)火-延伸反應，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增反(fǎn)應(yīng)。擴增產物一般(bān)用電泳分析，不一(yī)定要用同位素(sù)，無(wú)放(fàng)射性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的(dí)純(chún)度要求(qiú)低(dī)
不需要分(fēn)離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可(kě)作(zuò)為擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可直接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標本(běn)如血液，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發，細胞，活PCR技(jì)術概(gài)論。
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